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細胞融合法による、視交叉上核内単一細胞種の不死化

通过细胞融合法实现视交叉上核中单一细胞类型的永生化

基本信息

批准号：
08680865
负责人：
篠原一之
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1997
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680865/
关键词：
生物時計視交叉上核不死化細胞細胞融合神経芽細胞腫

项目摘要

概日リズムをもたらす生物時計は、哺乳類では視交叉上核(SCN)に存在する。SCN細胞を神経芽細胞腫と細胞融合することによって不死化し、遺伝的、細胞生物学的性質の均一な細胞群(クローン)を得ることを目的に下記の実験を行い、結果を得た。(1)細胞融合法の確立:分散化したマウスのSCN細胞を、神経芽細胞腫と細胞融合するための条件を検討したところ、phytohemagglutinin-P(PHA)を含む培地に懸濁し、37Cで10分間incubationした後、ポリエチレングリコールを室温で作用させる方法が一番効率が良く、かつ細胞の生存率も高かった。(2)不死化神経細胞の獲得:上記方法で融合した細胞のみを、特殊な培地で選択したたところ、30コロニー得られた。(3)細胞のクローン化:得られたコロニーの細胞を低密度で培養し、染色体構成や細胞学的性質の均一な細胞群を7クローン得た。(4)継代による染色体数の変化の検討:得られたクローンを5世代、継代する間に染色体数は変化していった。ところが、10世代継代するとその後はあまり染色体数が変化しないことから、10世代継代後にもう一度クローン化することによって安定したクローンが得られることが解った。

The existence of supra-chiasmatic nucleus (SCN) in biological chronometer and mammalian species has been tested every day. SCN cell fusion cell (1) the establishment of the method of cell fusion: decentralized cell fusion, cell fusion, SCN cell fusion, cell fusion, cell fusion and cell fusion. (2) the immortal god has obtained the following results: the above method is to fuse the cells, select the special ones, and get the results from the 30-year-old. (3) the differentiation of the cells: the low-density culture of the cells, the homogenization of the chromosome formation of the cells and the success of the cell population. (4) chromosome number of generations: the number of chromosomes of generations and generations was obtained. After the 10th generation, the chromosome number was changed, and the chromosome number was changed. After the 10th generation, the chromosome number was changed, and the chromosome number was changed.