トランスグルタミナーゼの基質としてのゲルゾリン-アポトーシスとの関連-

凝溶胶蛋白作为转谷氨酰胺酶的底物-与细胞凋亡的关系-

基本信息

批准号：
08680729
负责人：
土居幸雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アクチンは細胞骨格の一種として広く真核細胞に分布しており、細胞形態の保持や変化、細胞運動、細胞分裂など細胞活動の全般にわたり深く関与している。アクチンのこれらの働きは、種々のアクチン調節タンパク質により制御されているので、その制御機構を解明することは細胞の働きを理解するうえで重要である。ゲルゾリンは広く脊椎動物の体液や細胞内に見い出されるアクチン調節タンバク質の一つで、そのアクチンに対する作用は多岐にわたる。本研究では、アポトーシスを起こした細胞が不可逆的細胞周期に入ったときその活性が上昇することの知られているトランスグルタミナーゼと、アクチンフィラメントの再構築の制御に関与しているゲルゾリンとが、アポトーシス小体の形成にどのように関連しているかについて検討することを目的とした。アクチンはカルシウム存在下で細胞内トランスグルタミナーゼの基質となり、そのGln41がアミノ基を持った低分子物質と架橋形成することが知られているが、アクチン分子同志は架橋されない。ゲルゾリンに低分子の蛍光物質を基質として用いたところ、カルシウム存在下で平均1個の標識が入り、その導入部位はゲルゾリンのGln393であることが確認された。また、トランスグルタミナーゼによるこの修飾によりゲルゾリンのアクチン重合促進活性、アクチンフィラメント切断活性には影響がなかった。ゲルゾリンでキャップされたアクチンフィラメントにトランスグルタミナーゼを作用させたところ、アクチンの架橋産物とゲルゾリン-アクチン複合体の架橋産物の生産が観察され、キャップされたアクチンフィラメントの微小な構造の違いがトランスグルタミナーゼにより認識される可能性を示唆した。

肌动蛋白是一种广泛分布在真核细胞中的细胞骨架，并深深地参与细胞活性，包括细胞形态保留和变化，细胞运动和细胞分裂。由于肌动蛋白的这些功能受各种肌动蛋白调节蛋白的调节，因此了解细胞的调节机制很重要。凝胶素是肌动蛋白调节的轰击之一，在脊椎动物体液和细胞内细胞中广泛发现，其对肌动蛋白的影响多样。这项研究旨在研究当凋亡细胞进入不可逆的细胞周期时，跨谷氨酰胺酶的活性增加，而参与肌动蛋白丝重建的调节的凝胶素与凋亡体的形成有关。已知肌动蛋白在存在钙的存在下用作细胞内转谷氨酰胺酶的底物，而GLN41已知，该肌蛋白与携带氨基群的小分子形成一个交联，但肌动蛋白分子的同志却没有交叉链接。当使用凝胶素用作底物时，在钙存在下平均包括一个标签，并确认引入的位点为Gelsolin的Gln393。此外，转谷氨酰胺酶的这种修饰不会影响凝胶素的肌动蛋白聚合启动子活性或肌动蛋白丝裂解活性。当将转谷氨酰胺酶应用于用凝胶蛋白限制的肌动蛋白丝时，观察到肌动蛋白的交联产物和凝胶蛋白 - 肌动蛋白复合物的交联产物的产生，这表明经glutaminase可能会识别出肌动蛋白丝的微结构差异。