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ゲルゾリンのアクチン繊維キャップ機構について

关于凝溶胶蛋白的肌动蛋白纤维帽机制

基本信息

批准号：
05680583
负责人：
土居幸雄
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680583/
关键词：
ゲルゾリンアクチンアクチン結合タンパク質細胞骨格

项目摘要

アクチンは細胞骨格の一種として広く真核細胞に分布しており、細胞形態の保持や変化、細胞運動、細胞分裂など細胞活動の全般にわたり深く関与している。アクチンのこれらの働きは、種々のアクチン調節タンパク質により制御されている。ゲルゾリンはアクチン繊維を切断し、その+末端に留まりその後のアクチン重合を阻害(キャップ)したり、G-アクチンの重合の際にはアクチンの「核」を安定化させる作用を持つ。ゲルゾリンは広く哺乳動物に存在し、Caやフォスファチジルイノシトールポリリン酸などによりそのアクチン結合能が影響を受けるので、アクチン繊維の形成・脱重合の制御における一つの要と考えられている。本研究では、ゲルゾリンの作用機作解明を目的とし、ゲルゾリンの持つ多様な機能のうち、特にアクチン繊維のキャップ構造の詳細を調べた。・ゲルゾリンが結合しているアクチン2分子は、F-アクチンの軸に沿った「縦」2つのサブユニットか、軸に直交する「横」2つのサブユニットか不明である。アクチンのCys374とLys191とを架橋した「横」のアクチン二量体はゲルゾリンと強く結合したので、報告されているように、酵素を用いて光架橋剤をアクチンのGln41に導入し、縦の2つのアクチン分子を固定化を試みたが、ゲルゾリンとの相互作用を調べるのに十分量の二量体は精製できなかった。・トランスグルタミナーゼを用いてゲルゾリンに蛍光物質(ダンシル)の導入を試みたところ、カルシウム存在下で平均1個の標識が入り、導入部位を決定したところ、ゲルゾリンのGln393にダンシルが導入されたことが確認された。このダンシルゲルゾリンを供与体として、Cys374にローダミンの導入されたアクチンを受容体として用い、蛍光エネルギー移動を測定したところ、アクチン-ゲルゾリン複合体におけるこれらの残基間の距離は34Aと求められた。

The cellular skeleton is a kind of eukaryote, which is closely related to the distribution, maintenance and transformation of cell morphology, cell movement and cell division. The name of the person who is responsible for the crime is the name of the person responsible for the crime. In addition, the "core" of the "G" is stabilized when the "G" is overlapped. The existence of a complex complex in mammals, the existence of a complex in mammals, the This study aims to clarify the mechanism of the interaction between the two molecules, and to adjust the structure of the interaction between the two molecules. 2 molecules, F-2 molecules, F-2 molecules, F- Cys374 and Lys191 are used as bridging agents for the introduction of Cys374 and Lys191, and the interaction between Cys 374 and Lys 191 is regulated. In the presence of a group, an average of 1 mark is used to determine the position of introduction of the fluorescent substance. Cys374, Cys374