納豆に含まれるビタミンK結合性ペプチド

纳豆中含有的维生素 K 结合肽

基本信息

批准号：
13878020
负责人：
土居幸雄
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13878020/
关键词：
ビタミンK 納豆ペプチド Caco-2 メナキノン

项目摘要

納豆の摂取が骨粗鬆症の予防に有効であることが報告されている。この理由は、納豆のビタミンK含量が高く、納豆を摂取することで血清ビタミンK濃度が上昇するためである。我々は、納豆菌の生産するビタミンKが特異的な糖ペプチド成分(vitamin-K binding factor ; KBF)と結合し、安定なミセルとして可溶化されていることを見いだしており、本研究では、納豆中のKBFの存在がビタミンKの体内への消化吸収を促進しているのではないかと考えて実験を開始した。今年度は精製したKBFを用い、腸管上皮培養細胞におけるビタミンKの膜透過、細胞透過性に関する実験を行った。試料としてビタミンK(MK-7)のみ,あるいは,KBF画分を含む培地をのせて細胞透過実験を行なった。その結果、細胞を通過する量はいずれの場合も1%以下であった。細胞内に取り込まれる量は、KBF無添加の場合,多くても約2%であった。KBFを添加した場合、追加したMK-7濃度にかかわらずビタミンKの約10%が細胞内に移行していた。次に、透過の時間経的過を観察した。ここでは、ビタミンKをタウルコール酸ナトリウムを用いてあらかじめミセルの形で添加してた。0〜5時間にかけて、KBFを加えた場合は細胞に含まれるMK-7量は徐々に増加した。しかし、MK-7の細胞透過速度は遅く,KBFの存在下においても,5時間の培養でMK-7の細胞透過は殆ど観察されなかった。また、別の実験でミセルを形成させずに同様の実験をした場合、細胞内に移行したビタミンKは5時間後で6%で、ミセルを形成させた方がビタミンKを細胞へ取り込みやすかった。以上の結果、腸管上皮培養細胞にMK-7が吸収されるとき、KBPの添加は細胞内への移行を促進していることがわかった。これはKBFがMK-7と複合ミセルを形成するためではないかと考えた。しかし,その他の吸収機構も否定されたわけではない。

据报道，纳托消耗可有效预防骨质疏松症。这样做的原因是，纳托（Natto）的维生素K含量很高，而消耗纳托（Natto）时，血清维生素K浓度会增加。我们发现，纳托细菌产生的维生素K与特定的糖肽成分（维生素-K结合因子； KBF）结合，并被溶解为稳定的胶束。在这项研究中，我们开始了我们的实验，认为KBF在Natto中的存在促进了维生素K的消化和吸收。今年，我们使用纯化的KBF对在肠上皮细胞中培养的维生素K的膜渗透性和细胞通透性进行了实验。细胞渗透实验是通过仅将维生素K（MK-7）作为样品或含有KBF级分的培养基进行的。结果，在每种情况下，通过细胞的数量小于1％。当不添加KBF时，在细胞中占的量最多约为2％。当添加KBF时，无论增加MK-7浓度如何，将约10％的维生素K转移到细胞中。然后观察到渗透的时间。在这里，使用牛乳钠提前以胶束形式添加维生素K。在0-5小时内，当添加KBF时，细胞中包含的MK-7量逐渐增加。然而，MK-7的细胞渗透率很慢，即使在KBF存在下，在培养物中几乎没有观察到MK-7的细胞渗透5小时。此外，当在另一个实验中进行类似的实验而没有形成胶束时，在5小时后转移到细胞中的维生素K的量为6％，并且在形成胶束时将维生素K掺入细胞中更容易。结果，发现当MK-7吸收到培养的肠上皮细胞中时，KBP的添加会促进细胞内迁移。我们认为这是因为KBF与MK-7形成复杂的胶束。但是，其他吸收机制也没有被否认。