Production of transgenic plants and physiological characteritics of the plants.

转基因植物的产生和植物的生理特性。

• 批准号: 09660015
• 负责人: TANAKA Osamu
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Konan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09660015/
• 关键词: Aluminum borate whiskers; Rice; Silicon carbide whiskes; Transformation; Transgenic plant; 花成反応; シリコンカーバイトウィスカ-; ほう酸アルミニウムウィスカ-

A transformation of a japonica rice (Oryza sativa cv. Notohikari) has been accomplished by the use of silicon carbide whiskes (SCW) or aluminum borate whiskers (ABW) to deliver DNA into the scutellar tissues of embryos isolated from mature seeds. DNA delivery was mediated by mixing in the presence of plasmid DNA and SCW or ABW.Some parameters of DNA delivery employing SCW or ABW were determined in the tissues based on the transient expression of b-glucronidase (GUS) reporter gene. The optimum condition was established as the mixing of 290 ul buffer containing 25 ug DNA, 20 tissues and 2 mg of SCW or 64 mg ABW for 30 min. Under these conditions, we tried to introduce bar gene whose product confers resistance to the bialaphos into the tissues, together with GUS gene, and obtained the bialaphos resistance calli. Transgenic rice plants were regenerated from them. The integration of GUS gene and bar gene were confirmed by GUS histochemical assay and PCR analysis, respectively. Southern hybridization analysis alsoconfirmed the integration of bar gene. These results suggest that a simple and inexpensive DNA delivery procedure via ABW can be useful to produce transgenic rice plants.

粳稻（Oryza sativa cv.）的转化。Notohikari)是通过使用碳化硅晶须（SCW）或硼酸铝晶须（ABW）将DNA传递到从成熟种子中分离出来的胚胎的胸膜组织中来实现的。在质粒DNA和SCW或ABW存在的情况下，通过混合介导DNA传递。根据b-葡萄糖苷酶（GUS）报告基因的瞬时表达，确定了SCW或ABW在组织中传递DNA的一些参数。最佳条件为290 ul含25 ug DNA的缓冲液，20个组织和2 mg SCW或64 mg ABW混合30 min。在此条件下，我们尝试将具有抗性的bar基因与GUS基因一起导入组织，获得了抗双磷愈伤组织。从它们身上再生出转基因水稻植株。GUS基因和bar基因的整合分别通过GUS组织化学和PCR分析得到证实。南方杂交分析也证实了bar基因的整合。这些结果表明，通过ABW的一种简单而廉价的DNA传递程序可用于生产转基因水稻。

项目成果

田中修: "窒素欠乏による花芽分化の誘導機構" 化学と生物. 35(2). 74-76 (1997)

Osamu Tanaka：“缺氮诱导花芽分化的机制”，化学与生物学，74-76（1997）。

Junjo Matsushita: "Production of fertile transgenic rice plants by silicon carbide whisker-mediated DNA delivery" Breeding Science. in press. (1999)

Junjo Matsushita：“通过碳化硅晶须介导的 DNA 传递生产可育的转基因水稻植物”育种科学。

平井源一: "水稲の光合成速度が光合成産物(^<13>C)の転流に及ぼす影響" 近畿作物・育種研究. 44. 36-38 (1998)

Genichi Hirai：“水稻光合速率对光合产物转运的影响（^<13>C）”近畿作物育种研究44. 36-38（1998）。

別府敏夫: "人・植物・環境" 全国日本学士会, 200 (1998)

别府敏夫：“人类、植物和环境”日本研究学会，200（1998）

大原 雅: "花の自然史"北海道大学図書刊行会. 262 (1999)

大原胜：《花的自然史》北海道大学图书馆出版协会262（1999）。