Development of mouse hepatocyte permissive to HBV infection

小鼠肝细胞的发育允许乙型肝炎病毒感染

• 批准号: 22K19447
• 负责人: 村松 正道
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19447/
• 关键词: ウイルス; B型肝炎; マウスモデル; ウイルス複製; 感染受容体; hepatitis B virus; mouse; tropism; host factors

ヒト特異的ウイルスであるB型肝炎ウイルス(HBV)のマウス感染動物モデルの作成を目指している。B型肝炎では、現在臨床応用されている抗ウイルス剤は逆転写酵素阻害剤の１種類しかなく、逆転写酵素阻害剤はウイルス複製を有効に阻害するが、これだけではウイルスを肝細胞からウイルスを駆逐できない。ウイルス排除に至る治療方法や治療薬の開発が切に求められている。しかし、未だ２剤目が登場しておらず、抗ウイルス剤開発が遅延している要因の１つに適切なマウスモデルがないことがある。HBVがマウスに感染しないことがマウスモデル構築の最初のハードルであるが、2012年にヒト特異的HBV感染受容体が、胆汁酸受容体NTCPであることが報告され、俄に感染特異性要因の探索がホットとなった。本研究計画では、まずヒトNTCPを強制発現したマウスを作成することでHBV感染マウスモデルが構築できないか検討した。残念ながら、ヒトNTCPを強制発現したマウスやマウス肝細胞株は、明らかなHBV感染複製は観察されなかったが、HBVと同じ表面ウイルス蛋白(HBsAg)を持つデルタウイルスは感染の確認ができた。次にヒト由来の候補共益膜蛋白とNTCPの共発現でHBV感染がマウス肝細胞株で確認できるか検討したが、いずれの候補因子もHBV感染は確認できなかった。ヒトNTCPに加えて、１因子を追加するだけでは、マウスの肝細胞株は、HBV感染許容しないことがわかった（少なくとも選んだ候補では）。一方、デルタウイルスは、ヒトNTCPの発現のみでマウスにin vitro 及びin vivo両方で、少なくとも感染（侵入）できることがわかったが、HBsAgの供給がないためこの実験条件ではウイルスの効率良い放出は起こらないことがわかった。

Hepatitis B virus (HBV) infection in animals Hepatitis B is now clinically used in the treatment of hepatitis B. One type of enzyme inhibitor is used to inhibit the replication of hepatitis B. The treatment method and the development of the treatment agent are all excluded. The main reason for this is that there are two kinds of problems: one is the appearance of the problem, the other is the development of the problem. HBV infection, bile acid receptor, NTCP, Russian infection specific factors were explored in 2012. This study aims to investigate the development of HBV infection by NTCP. HBV infection replication is detected in liver cell lines and HBV surface protein (HBsAg) is detected in liver cell lines under stress. In addition, the co-discovery of the candidate co-benefit membrane protein and NTCP confirmed HBV infection in the Marusus hepatocyte line, and the candidate factors that were present confirmed HBV infection. NTCP is added, factor 1 is added, and HBV infection is allowed. In one case, NTCP is found in vitro and in vivo, less infection (invasion), HBsAg supply, and the conditions for its effective release.