Optimierung und therapeutische Anwendung tumorselektiver siRNA Formulierungen gegen Komponenten des Wnt-Signalwegs in gastrointerstinalen Tumormodellen

Ziel des Projekts is die Entwicklung effizienter nukleinsäurebasierter Therapiestrategien in vivo.该方法是利用人工合成的方法，以多聚阳离子为基础合成siRNA。Kovalent和Vektor gekoppelter Ligand Epidermaler Wachstumsfaktor（EGF）在异种（HepG 2）肿瘤模型细胞中系统性表达的siRNA的肿瘤转移中的作用。荧光标记siRNA的验证和靶点敲唐斯（Luziferase）的效果通过体内成像进行。因此，可最大限度地提高生物转化效率，使肿瘤脱靶毒性韦尔登。在肿瘤特异性siRNA转移的肿瘤模型系统（HepG 2，人类自身免疫性大肠杆菌，未通过人大肠杆菌）中的预治疗韦尔登方法，可以通过特异性siRNA转移调节Wnt信号通路的相关功能。体内靶向β-连环蛋白的功能将通过一种稳定的TOPflash-Konstrukt转染肿瘤并具有生物学效应的治疗（肿瘤）。在一个同基因的CRC转移模型（CT 26）中，通过siRNA敲除的治疗效果也可能通过siRNA处理的脱靶效应。

Ziel des Projekts ist die Entwicklung effizienter nukleinsäurebasierter Therapiestrategien in vivo. Der methodische Teil beinhaltet die Entwicklung synthetischer, polykationbasierender siRNA Transfervektoren. Kovalent an den Vektor gekoppelter Ligand Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF) ermöglicht den Tumor-zielgerichteten Transfer der siRNA nach systemischer Applikation in einem xenogenen (HepG2) Tumormodell. Die Verteilung der fluoreszenzmarkierten siRNA und die Effizienz des Target knock downs (Luziferase) erfolgt durch in vivo Imaging. Hierbei soll bei Maximierung der Bioverfügbarkeit und Effizienz im Tumor die Off- Target Toxizität minimiert werden. Im präklinisch-therapeutischen Teil werden in den jeweiligen Modellsystemen (HepG2, humanes Kolonkarzinom aus einer eigenen Sammlung gut charakterisierter, niedrig passagierter humaner Kolonkarzinom Zelllinien) funktionell relevante Komponenten des Wnt-Signalwegs durch tumorselektiven siRNA Transfer herunterreguliert. Die funktionelle Effizienz des in vivo- Targetings von ß-Catenin wird in den mit einem TOPflash-Konstrukt stabil transfizierten Tumorzellen verfolgt und mit den biologischen Effekten der Therapie (Tumorwachstum) korreliert. In einem syngenen CRC Metastasenmodell (CT26) wird sowohl der therapeutische Effekt durch siRNA Knockdown verfolgt als auch potentielle off-target Effekte durch siRNA Behandlung.