Tomotherapy and Hematopoietic Stem Cells for Tolerance to Kidney Transplants

TomoTreatment和干细胞移植对肾脏移植的耐受性增强。 -- 摘要： 下半身 这一项目的首要目标是为MHC和不同的肾脏开发一种新的耐受性和诱导方案。 在恒河猴和猕猴体内进行移植，以进一步阐明其诱导分化和维护的潜在机制。 在这个模型中，存在混合的嵌合体和不同的耐受性。第二个主要的研究假设是，对MHC的耐受性是不匹配的。 肾移植是一种安全、有效的移植方法，通过建立一种新的方法建立一种新型的混合嵌合体移植模式。 建立了移植后非清髓性、螺旋CT放射疗法和全淋巴系统放射治疗(TLI)- 根据调理方案，随后是供者骨髓-CD34+造血干细胞(HSC)输注。 此外，我们还将阐明与这些疾病密切相关的宿主免疫调节功能特征的机制。 成功地完成了HSC的嫁接和对嵌合体状态的维护工作。我们将提出以更多的手段来验证我们的假设的方法。 2.具体目标：1)联合应用骨髓、造血干细胞/肾脏移植，以进一步确定移植方案。 在接受完全不同和无关的供体肾移植的恒河猴和猕猴中，有5%的人可能实现嵌合体。 (如果没有GVHD)药物和药物只能在超过2年的时间内从所有免疫抑制药物中撤出。 维持正常的同种异体移植的功能和功能，而不出现排斥反应。我们将继续测量中国混合嵌合体的状态。 根据各种外周血细胞和骨髓细胞的变化，受者被认为是移植后时间的主要功能指标。 类型包括使用DNA序列(STR)进行分析，用流式细胞术检测，使用恒河猴血清抗体和特异性抗体检测MHC-I类。 (2)免疫监测、免疫病理学和免疫能力。(我们将：(A)) 确定早期受者对以TLI为基础的TLI诱导的宿主髓系细胞的免疫调节功能的变化。 调节方案(与骨髓移植的成功与否相关)决定了这两种疗法是否混合。 嵌合状态诱导宿主树突状细胞和供者MHC-I类抗原和Pd-Li的获得性改变。 在撤除免疫抑制药物后，在一系列的时间段中和之后的一系列时间段中的表现(c.)可以表征这种情况。 通过对一系列同种异体肾移植患者的肾活检、肾移植和肾移植的分析，探讨移植肾免疫功能的发展和非免疫性肾损伤的发生。 D.)通过临床检测，确定免疫抑制药物停药后受试者的免疫能力水平。 这次召回是因为T细胞对巨细胞病毒抗原和破伤风类毒素的反应。通过这次召回，我们获得了更多的知识。 恒河猴对诱导方案的耐受性，包括其潜在的免疫调节机制，将不会有直接的影响。 这与一系列种类繁多的已故心脏捐赠者的移植有关。此外，它还将为医疗保健开辟一条新的道路。 创新和交付意味着，它将极大地造福于移植患者、患者和其他潜在的患者群体。

Tomotherapy and Hematopoietic Stem Cells for Tolerance to Kidney Transplants    ABSTRACT      The  overarching  goal  of  this  project  is  to  develop  a  tolerance  induction  protocol  for  MHC  disparate  kidney  transplants in rhesus macaques and to elucidate the underlying mechanisms of the induction and maintenance  of mixed chimerism and tolerance in this model. The primary hypothesis is that tolerance to MHC mismatched  kidney transplants can be safely and effectively achieved by establishing a mixed chimeric state using a newly  established  post‐transplant  non‐myeloablative,  helical  tomotherapy‐based  total  lymphoid  irradiation  (TLI)‐ based  conditioning  regimen  followed  by  donor  bone  marrow‐CD34+  hematopoietic  cell  (HSC)  infusions.  In  addition,  we  will  elucidate  mechanisms  of  host  immunoregulatory  characteristics  that  are  associated  with  successful HSC engraftment and maintenance of the chimeric state. We propose to test our hypotheses by means  of  2  specific  aims:  1.)  Combined  Bone  Marrow  Hematopoietic  Cell/Kidney  Transplants  to determine  the  proportion of rhesus macaque recipients of disparate unrelated donor kidney transplants that achieve chimerism  (without  GVHD)  and  can  be  withdrawn  from  all  immunosuppressive  drugs  for  greater  than  2  years  while  maintaining normal allograft function and without rejection. We will measure the state of mixed chimerism in  recipients as a function of time post‐transplant and according to various peripheral blood and bone marrow cell  types  using  DNA  (STR)  analysis,  and  with  flow  cytometry  using  rhesus  antibodies  specific  for  MHC  class  I  Mamu alleles of the donor.  2) Immune Monitoring, Immunopathology and Immunocompetence.  We will: a.)  determine  early  recipient  immunoregulatory  changes  of  host  myeloid  cells  induced  by  the  TLI‐based  conditioning regimen that correlate with the success of bone marrow engraftment, b.) determine if the mixed  chimeric  state  induces  changes  of  host  dendritic  cell  acquisition  of  donor  MHC  class  I  antigen  and  PD‐LI  expression  at  serial  time  points  during  and  after  withdrawing  immunosuppression,  c.)  characterize  the  development of renal allograft immune and non‐immune injury by analysis of serial renal allograft biopsies, and  d.) determine the degree of recipient immune‐competency after immunosuppressive drug withdrawal by testing  the  recall  T  cell  responses  to  cytomegalovirus  antigens  and  tetanus  toxoid.  Knowledge  gained  through  this  rhesus  tolerance  induction  protocol,  including  the  underlying  immunological  mechanisms,  will  have  direct  relevance  to  a  variety  of  deceased  donor  transplants.  Furthermore,  it  will  set  a  new  course  of  healthcare  innovation and delivery that will greatly benefit transplant patients, and other patient populations.