TRANSPOSON MUTAGENESIS OF NUCLEAR POLYHEDROSIS VIRUSES
核多角体病毒的转座子诱变
基本信息
- 批准号:3071018
- 负责人:
- 金额:$ 6.37万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1991
- 资助国家:美国
- 起止时间:1991-06-01 至 1996-05-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Transposition is a form of genetic rearrangement common among both
prokaryotic and eukaryotic organisms. It likely involves recombinational
mechanisms that are probably active in many types of genome rearrangements
including T-cell receptor and immunoglobulin gene rearrangements, gene
amplification, gene disruption, and oncogene activation. The consequences
of transposon mobilization for the evolution of higher organisms and/or
eukaryotic viruses could be substantial. The FP mutants of nuclear
polyhedrosis viruses (NPVs) provide a unique experimental system for
molecular analysis of key aspects of transposon movement. Many of these
spontaneous mutants arise through the insertion of host transposons within
a 500 bp region of the viral genome called the FP locus. The mutant
phenotype results in a distinctive plaque morphology and dominant
amplification of the mutants during propagation in cell cultures. These
properties can be exploited in developing an in vitro transposition assay
using cloned, lacZ fusion genetagged transposons and target viral DNAs.
The proposed research will focus on analysis of Trichoplusia ni transposons
IFP2 and TFP3 that exhibit target site specificity and insertion site
preference within the FP locus of two closely related NPVs. The effect of
mutations at viral target sites or within transposon termini on the
insertion and excision of these elements will be studied. The ability to
analyze site-specific insertion of transposons at the molecular level is a
distinguishing feature of this system. We will also introduce recombinant
NPV carrying various P-element constructs into Drosophila melanogaster cell
cultures and embryos to analyze the potential for vectoring of transposons
between species by viruses. The PI has made significant contributions in
understanding the genetics of FP mutants and is now ready to develop this
unique system as an experimental model for eukaryotic transposition
phenomena. The PI has completed one three year grant and is beginning a
five year continuation grant on this subject, and should not yet be
considered an established investigator. This award will allow the PI to
direct efforts towards establishing his lab as a focus of research on
transposon genetics. The University is committed to developing a vigorous
research program in Molecular Genetics. The PI is the first tenured
Molecular Geneticist at this institution and is responsible in large part
for the further development of the research program. This award will
enhance the PIs ability to take a more direct role in training graduate
students and participating in the research development of the newer faculty
in this program.
转座是一种常见的基因重排形式
原核生物和真核生物。它很可能涉及重组
可能活跃在多种类型的基因组重排中的机制
包括T细胞受体和免疫球蛋白基因重排,基因
扩增、基因破坏和癌基因激活。后果是什么?
转座子动员在高等生物和/或进化中的作用
真核病毒可能是大量的。核的FP突变体
多角体病毒(NPV)提供了一种独特的实验系统
转座子运动关键因素的分子分析。其中许多
自发突变是通过将宿主转座子插入到
病毒基因组的一个500个碱基对的区域称为FP基因座。变种人
表型导致独特的斑块形态和显性
突变体在细胞培养中繁殖过程中的扩增。这些
在开发体外转座试验中可以利用这些特性
使用克隆的LacZ融合基因标记转座子和靶向病毒DNA。
拟议的研究将集中在分析毛霉菌ni转座子上。
显示靶点特异性和插入位点的IFP2和TFP3
在两个密切相关的NPV的FP基因内的偏好性。的影响
病毒靶点或转座子末端的突变
这些元素的插入和删除将被研究。有能力
在分子水平上分析转座子的定点插入是一种
这一系统的显著特点。我们还将介绍重组
携带不同P元素结构的NPV进入果蝇细胞的研究
培养和胚胎分析转座子载体的潜力
通过病毒在物种之间传播。国际和平研究所在以下方面做出了重大贡献
了解FP突变体的遗传学,现在准备开发这一技术
作为真核细胞转座实验模型的独特系统
现象。PI已经完成了一项为期三年的拨款,并正在开始一项
关于这一主题的五年续期补助金,现在还不应该
被认为是一名公认的调查员。这项裁决将允许私人侦探
直接努力建立他的实验室,作为研究的重点
转座子遗传学。大学致力于发展一个充满活力的
分子遗传学研究计划。PI是第一个终身教职
该机构的分子遗传学家,在很大程度上
为研究计划的进一步发展而作准备。这一奖项将
提高绩效指标能力,在研究生培养中发挥更直接的作用
学生和参与新教员的研究开发
在这个节目中。
项目成果
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