REGULATION OF CA PUMP BY THE PROTEIN KINASE PATHWAY

蛋白激酶途径对 CA 泵的调节

基本信息

  • 批准号:
    6180679
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 6.76万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    1997-08-01 至 2001-07-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

DESCRIPTION: This is a study of the protein kinase pathway by which extracellular agonists regulate the plasma membrane Ca2+ pump. The Ca2+ pump exists in the plasma membrane of heart, smooth muscle, kidney, brain, intestinal epithelium, erythrocyte and many other cell types. It is involved in control of intracellular Ca2+ levels in cells of all kinds and in movement of Ca2+ across epithelial cell layers such as the intestinal and kidney tubule epithelia. Studies on the phosphorylation of plasma membrane Ca2+ pump by protein kinases will be combined with studies on the effect of such phosphorylation on the activity of the plasma membrane Ca2+ pump. Information about the effect of protein kinases on this pump will provide an essential link in determining how agonists influence intracellular function by means of the Ca2+ signal. The pump consists of a single polypeptide chain of molecular weight about 135,000 (the exact molecular weight depends on the isoform). We have succeeded in expressing this pump in COS cells and have developed an assay system for determining activity of the expressed enzyme. We propose studies designed to determine the exact locus and nature of the control of the pump s activities by protein kinases. We will use truncated mutants and point mutants of the pump to determine the exact site of phosphorylation and will carry out activity assays under conditions almost identical to those of phosphorylation to determine how the phosphorylation at a given point activates the enzyme. We will raise antibodies against the phosphoenzymes, which should be very useful in determining the role of phosphorylation after stimulation of specific kinds of cells.
描述:这是一项蛋白激酶途径的研究, 细胞外激动剂调节质膜Ca 2+泵。 的Ca2+ 泵存在于心脏、平滑肌、肾、脑的质膜, 肠上皮、红细胞和许多其它细胞类型。 是 参与控制各种细胞中的细胞内Ca2+水平, 在Ca2+穿过上皮细胞层(如肠和 肾小管上皮细胞 质膜磷酸化的研究 将结合蛋白激酶对钙泵的作用研究, 这种磷酸化对质膜Ca 2+泵的活性的影响。 关于蛋白激酶对这种泵的作用的信息将提供一个 确定激动剂如何影响细胞内功能的重要环节 通过Ca2+信号。 该泵由分子量约为10000的单链多肽链组成。 135,000(确切的分子量取决于异构体)。 我们有 成功地在COS细胞中表达了这种泵,并开发了一种测定方法, 用于测定所表达的酶的活性的系统。 我们建议研究 设计用于确定泵控制的精确轨迹和性质 蛋白激酶的活性。 我们将使用截短突变体和点 突变的泵,以确定磷酸化的确切位点,并将 在几乎相同的条件下进行活性测定, 磷酸化,以确定在给定点的磷酸化 激活酶。 我们会产生抗磷酸酶的抗体, 这在确定磷酸化的作用时应该是非常有用的, 刺激特定类型的细胞。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Protein kinase C phosphorylates plasma membrane Ca2+ pump isoform 4a at its calmodulin binding domain.
蛋白激酶 C 在其钙调蛋白结合域磷酸化质膜 Ca2 泵同工型 4a。
  • DOI:
    10.1074/jbc.274.1.527
  • 发表时间:
    1999
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Verma,AK;Paszty,K;Filoteo,AG;Penniston,JT;Enyedi,A
  • 通讯作者:
    Enyedi,A
Chimaeras reveal the role of the catalytic core in the activation of the plasma membrane Ca2+ pump.
Chimaeras 揭示了催化核心在质膜 Ca2 泵激活中的作用。
  • DOI:
    10.1042/0264-6021:3560241
  • 发表时间:
    2001
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ba-Thein,W;Caride,AJ;Enyedi,A;Pászty,K;Croy,CL;Filoteo,AG;Penniston,JT
  • 通讯作者:
    Penniston,JT
Plasma membrane Ca(2+) pump isoform 3f is weakly stimulated by calmodulin.
质膜 Ca(2 ) 泵同工型 3f 受钙调蛋白微弱刺激。
  • DOI:
    10.1074/jbc.275.6.4323
  • 发表时间:
    2000
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Filoteo,AG;Enyedi,A;Verma,AK;Elwess,NL;Penniston,JT
  • 通讯作者:
    Penniston,JT
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