Rôles des conductances calciques alternatives sur la réactivité électrophysiologique et contractile du tissu utérin gravide.

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Contexte et but: Les mécanismes moléculaires qui déclenchent les contractions utérines dans un utérus de mammifère gravide sont encore mal compris, car nous manquons d'information sur ce qui se passe réellement à l'interface membranaire des cellules utérines et au niveau des signaux impliqués dans le couplage intercellulaire. Le rôle des canaux calciques sensibles aux dihydropyridines apparaît central, mais celui des conductances Ca2+ alternatives à travers des canaux cationiques comme ceux de la famille des TRP n'a pas été étudié sur les propriétés fonctionnelles du myomètre à terme. Notre hypothèse est que les conductances Ca2+ alternatives pourraient jouer un rôle pré-conditionnant pour augmenter l'excitabilité physiologique de ces tissus dans différentes conditions expérimentales. Alternativement, en permettant une augmentation localisée du Ca2+ sous-membranaire, elles pourraient également contribuer à activer les conductances potassiques supportées par les canaux de type GKca, ce qui pourrait conduire à une hyperpolarisation et ainsi contrôler la durée des périodes de quiescence entre les contractions phasiques. Ce faisant, les conductances calciques alternatives (insensibles à la nifédipine) auraient une fonction importante dans le contrôle de la mise en travail de l'utérus chez de nombreux mammifères.***Objectifs spécifiques ***1) Réaliser des mesures de tensions isométriques in vitro sur des anneaux utérins issus des cornes utérines de rates gravides dans différentes conditions physiologiques (Contrôle et en présence de 0,3 µM PGE2), en absence et en présence de norgestimate, une substance qui inhibe les conductances cationiques supportées par les TRPC.***2) Déterminer la réactivité contractile de ces tissus en annulant ou en activant les conductances calciques alternatives à travers les canaux de type TRPV et tester leur localisation.***3) Mesurer les vagues de calcium en micro-spectrofluorimétrie confocale, en absence et en présence d'ocytocine ou de PGE2 et de modulateurs des conductances cationiques alternatives et les changements de sensibilité des myofilaments utérins au Ca2+. ***Pertinence: Nous testerons la pertinence physiologique des conductances cationiques perméables au calcium dans le myomètre pour ce faire nous utiliserons des outils pharmacologiques pour mieux comprendre les mécanismes membranaires et cellulaires qui modulent la quiescence et le déclenchement des contractions utérines. Par ailleurs nous prévoyons tester l'hypersensibilité calcique de la machinerie contractile sur des tissus perméabilisés à la Béta-escin et l'activation retardé des canaux K+ sensibles au Ca2+ (GKCa) qui ont un rôle dans le maintien de la quiescence utérine. En perspective notre programme de recherche s'intéressera au rôle modulateur des annexes (placenta et membranes foetales) dans le déclenchement et le maintien de la parturition.