树突状细胞（DC）识别“自我”和“非我”以及“危险”和“非危险”信号依赖于DC 对外源性和内源性信号的反应和调节。在热应激等条件下，核苷酸以及热休克蛋白（HSP）可以释放到胞外，作为“危险信号”对DC 的功能产生广泛影响。然而目前对于这些危险信号的分子机制仍然缺乏深入和细致的研究。我们发现，热应激可以促进肿瘤细胞释放ATP（60-150 nM）和HSP70（120-800 ng/ml），而且100 nM ATP可以和1 μg/ml HSP70协同促进小鼠骨髓来源DC（BMDC）炎症因子TNF、IL-1β和IL-6以及IL-12的产生，但是ATP和HSP70单独不能够有效促进炎性因子以及IL-12的产生，提示ATP与HSP70可以产生协同效应。同时，ATP与HSP70可以协同促进CD80、CD86和CD40的水平增高，IFN-β以及CCL5、CXCL10的表达也显著升高，提示nM水平的ATP可以协同HSP70促进DC的活化以及成熟。我们发现HSP70显著促进ATP诱导的MAPK和NF-kB的活化。在TLR4-/-的BMDC中，这种协同效应显著受到了抑制，提示这种协同效应很大程度上依赖于TLR4介导的信号活化。由于IL-12和许多Th1型细胞因子的增加，我们推测ATP可以和HSP70协同促进T细胞向Th1分化。我们采用ATP+HSP70处理的BMDC与小鼠脾脏来源的CD3+CD4+的T细胞共孵育，发现T细胞的增殖能力增加，而且分泌IL-2和IFN-γ的水平升高，但是IL-4等Th2型细胞因子的产生无显著变化，提示ATP和HSP70可以通过调节DC的活化和成熟诱导Th1型的T细胞免疫应答。100 nM水平的ATP可以活化PI-PLC-PKCδ/ε-Src信号通路促进TLR4介导的MAPK、NF-κB和IRF3的活化因此，我们的研究提示nM级别的ATP和较低水平的HSP70可以协同促进DC的成熟和活化，并且促进T细胞的Th1型分化，而且P2YR和TLR4信号通路之间存在交叉信号调控。我们的研究对于理解感染早期、非致命性损伤以及体育锻炼等低水平ATP和HSP70释放等情况下的免疫调节机制具有重要的科学意义。目前该课题发表基金标注SCI论文3篇，培养博士研究生2名，顺利完成了课题的计划任务，实现了预期研究目标。