TRIM52抑制乙型脑炎病毒增殖的分子机制研究
批准号:
31472227
项目类别:
面上项目
资助金额:
85.0 万元
负责人:
钱平
依托单位:
学科分类:
C1806.兽医传染病学
结题年份:
2018
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
魏燕鸣、张华伟、番文春、王榕、张栋、张冉冉、刘婷婷
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中文摘要
乙型脑炎是一种重要的虫媒性人兽共患传染病,不仅威胁畜牧业的生产安全,而且严重危害人类的健康。乙型脑炎病毒(JEV)侵入中枢神经系统,导致脑部炎症和神经损伤,感染者大约25%-30% 死亡,50%的幸存者导致永久性中枢神经系统后遗症,而阐明JEV在宿主中复制机制有助于其预防和治疗。因此,本项目拟以TRIM52为研究对象,利用超表达、siRNA干扰、噬斑实验、荧光素酶报告系统、激光共聚焦、蛋白质互作等技术,从病毒和宿主两个层次研究:(1)TRIM52对JEV增殖及其复制周期(病毒吸附、侵入、复制、包装和释放)的影响;(2)TRIM52与JEV编码蛋白相互作用及其生物学效应;(3)TRIM52三维结构的解析;(4)TRIM52激活NF-kB信号分子机制及其与抑制JEV增殖之间的关系。该研究为JEV新型疫苗和抗病毒药物设计提供理论依据。
英文摘要
Japanese encephalitis(JE) is an important mosquito-borne zoonotic disease, not only threating the safety of animal husbandry, but also causing a major public health problem in humans. Japanese encephalitis virus (JEV), the significant etiological agent of JE, invades the central nervous system(CNS)and induces inflammation of the brain and neuron damage with a case fatality rate of 20%-30% and permanent neuropsychiatric sequelae in 50% of survivors. In this project, tripartite motif(TRIM) protein 52 will be studied by the methods of TRIM52 overexpression and siRNA knockdown, plaque forming unit test, Dual-luciferase assay, confocal microscopy technology, and protein-protein interaction. We hope to address the following questions: (1) How to restrict JEV propagation by TRIM52 and which stages of viral replication(including attachment, entry, transcription of viral genes and viral release from the cells) will be targeted; (2)The interactions between TRIM52 and JEV encoded proteins and its biological function; (3) Illuminate TRIM52 structure and the mechanism how to active the NF-κB signal pathways and its physiological relevance with antiviral activity against JEV. This study will provide new lights for future work on TRIM52-mediated antiviral fuction and the development of novel vaccine and anti-viral strategies against JEV.
乙型脑炎是一种重要的虫媒性人兽共患传染病,不仅威胁畜牧业的生产安全,而且严重危害人类的健康。TRIM(Tripartite motif protein)家族蛋白具有多种生物学功能,包括调节天然免疫信号通路和抗病毒功能,是抗病毒天然免疫反应的重要调节因子。本项目中,通过实时荧光定量PCR分析病毒C基因拷贝数筛选鉴定TRIM52蛋白可以抑制JEV的增殖。TRIM52抑制JEV复制的分子机制是:TRIM52与JEV非结构蛋白NS2A存在相互作用,并介导NS2A发生K48类型泛素化修饰;可见TRIM52靶向NS2A并通过泛素-蛋白酶体途径使NS2A发生降解,进而抑制JEV的复制。而且TRIM52的 RING结构域在与NS2A的互作和介导NS2A降解中起着关键作用。同时,本研究采用双荧光素酶启动子活性试验筛选具有激活NF-κB信号通路的TRIM蛋白,结果表明TRIM52的表达可以激活NF-κB启动子活性,能上调NF-κB信号通路激活介导的前炎性细胞因子TNF-α和IL-6的mRNA表达水平。同时,TRIM52 RING结构域是其激活NF-κB信号通路所必需的。但是TRIM52的表达并不影响NF-κB抑制蛋白IκBα的降解或NF-κB亚单位p65的磷酸化水平的变化,而且NF-κB激活抑制剂BAY 11-7082和抑制蛋白IκBα的表达都不影响TRIM52对NF-κB的激活。本研究证实了TRIM52可以作为NF-κB信号通路的一个激活蛋白,可能通过在IκBα-p65蛋白水平对NF-κB进行调控,其详细的机制有待深入研究。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:DOI: 10.1038/srep33698
发表时间:2016
期刊:Sci Rep
影响因子:--
作者:Fan W;Wu M;Qian S;Zhou Y;Chen H;Li X;Qian P
通讯作者:Qian P
Antiviral activity of luteolin against Japanese encephalitis virus
木犀草素对日本脑炎病毒的抗病毒活性
DOI:10.1016/j.virusres.2016.04.021
发表时间:2016-07-15
期刊:VIRUS RESEARCH
影响因子:5
作者:Fan, Wenchun;Qian, Suhong;Li, Xiangmin
通讯作者:Li, Xiangmin
Integrin αvβ3 promotes infection by Japanese encephalitis virus
整合素αvβ3促进日本脑炎病毒感染
DOI:10.1016/j.rvsc.2016.12.007
发表时间:2017-04-01
期刊:RESEARCH IN VETERINARY SCIENCE
影响因子:2.4
作者:Fan, Wenchun;Qian, Ping;Li, Xiangmin
通讯作者:Li, Xiangmin
TRIM52 inhibits Japanese Encephalitis Virus replication by degrading the viral NS2A.
TRIM52 通过降解病毒 NS2A 抑制日本脑炎病毒复制
DOI:10.1038/srep33698
发表时间:2016-09-26
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Fan W;Wu M;Qian S;Zhou Y;Chen H;Li X;Qian P
通讯作者:Qian P
TRIM52: A nuclear TRIM protein that positively regulates the nuclear factor-kappa B signaling pathway
TRIM52:一种核 TRIM 蛋白,正向调节核因子-κ B 信号通路
DOI:10.1016/j.molimm.2017.01.003
发表时间:2017-02-01
期刊:MOLECULAR IMMUNOLOGY
影响因子:3.6
作者:Fan, Wenchun;Liu, Tingting;Qian, Ping
通讯作者:Qian, Ping
塞内卡谷病毒(SVV)中和抗体筛选及其中和机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:--
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2020
- 负责人:钱平
- 依托单位:
TRIM67负调控NF-κB信号通路的分子机制研究
- 批准号:31772713
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:60.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:钱平
- 依托单位:
猪瘟病毒NS2基因缺失毒株的构建及其作为载体的研究
- 批准号:30600447
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:21.0万元
- 批准年份:2006
- 负责人:钱平
- 依托单位:
国内基金
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