SnRK2类蛋白基因SAPK10在水稻种子发育和休眠中的功能研究

批准号:
31401366
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
24.0 万元
负责人:
张健
依托单位:
学科分类:
C1307.作物基因组及遗传学
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
侯雨萱、唐立群、邱结华
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中文摘要
脱落酸是一类重要的植物激素,SnRK2是脱落酸信号传导途径中的核心蛋白,大量数据表明SnRK2蛋白参与调控种子的粒型大小和休眠,但水稻中SnRK2蛋白基因的功能研究仍少有报道。我们前期的数据表明SAPK10表达量随种子的发育进程逐渐升高。过量表达SAPK10可以导致植株对脱落酸敏感,出现早抽穗,粒型变小和休眠加深等表型。本项目旨在研究水稻SnRK2类蛋白基因SAPK10在水稻种子发育和休眠中的功能。我们将通过对突变体和超表达植株种子发育和休眠过程中的表型观察和生理数据检测,明确其生物学功能;检测该基因的时空和胁迫处理下的表达模式,并明确蛋白的亚细胞定位;寻找下游调控基因,并找出SAPK10直接作用的磷酸化底物蛋白,明晰调控网络。本研究的实施将会极大增强我们对脱落酸信号通路的了解,并为分子育种提供基因资源,促进我国在水稻种子发育和脱落酸信号研究的国际竞争中处于有利地位。
英文摘要
Abscisic acid is a sort of phytohormone that plays important roles in plant development and abiotic stress response. As core protein members in ABA signaling pathway, SnRK2 proteins have been found to be involved in regulating seed size and dormancy as revealed by several studies. However, the functional study of SnRK2s in rice is still in its infancy. Our preliminary data showed that the expression level of SAPK10 increased with the time of seed development, indicating important roles of SAPK10 in seed development. Ectopic expression of SAPK10 conferred to ABA hypen-sensitivity of the transgenic lines and finally led to earlier flowering, smaller grains and deeper dormancy. This proposal aims to study the function of SAPK10, a SnRK2 type protein, in seed development and dormancy in rice. We will investigate the biological function of SAPK10 by phenotyically characterizing the mutants, RNAi and Over-expression lines, and also monitoring the physiological parameters in seeds. Meanwhile, we will examine the temporal- and spatial- expression pattern as well as the expression profile under different hormones and abiotic stress treatments. The subcellular localization of SAPK10 will also be investigated. Digital Gene Expression Tag Profiling technique will be used to find out the down-stream genes that regulated by SAPK10. Furthermore, we will employ yeast-two-hybrid technique and in-vitro phosphalase assay to indentify the phosphylation substrate proteins to elucidate the SAPK10 regulatory network. This study will greatly enhance our understanding of ABA signal transduction pathway, provide useful gene resources for rice molecular breeding, and thus put us in a good position in the international competitions in ABA signaling and rice seed development studies.
SnRK2是存在于植物中的一类丝氨酸/苏氨酸激酶家族,在响应ABA介导的种子发育和休眠过程中发挥着关键的作用。SAPK10是水稻中的SnRK2成员,其表达受ABA的诱导并随着种子的成熟而表达量逐渐增加。亚细胞定位显示SAPK10定位于细胞核。在自然栽培条件下,SAPK10超表达株系较野生型长势矮小,株高同时在粒型大小、结实率、千粒重、有效穗数、穗长方面均较野生型有明显的下降。种子品质分析发现SAPK10超表达株系较野生型在直链淀粉和总蛋白上有显著的差异, 而在支链淀粉和脂肪含量上的差异并不明显。通过核酵母双杂交、in vitro Pull-down和体内co-IP等实验,我们鉴定到SAPK10调控的靶基因-bZIP类转录因子A(简称bZIPA), 并通过质谱分析鉴定到SAPK10磷酸化修饰该靶蛋白的磷酸化修饰位点,同时通过体外磷酸化实验验证了两者间的激酶-底物修饰关系。本项目组发展了该靶基因的超表达和该磷酸化位点突变非磷酸化位点的模拟非磷酸化的超表达材料,研究表明bZIPA超表达株系对脱落酸敏感,较野生型Nip的种子休眠加深,萌发延迟,而模拟非磷酸化的bZIPASXA超表达株系对ABA的敏感度下降,萌发速率提高,表明SAPK10对bZIPA X位点的磷酸化修饰是该蛋白行使功能的重要开关。上述研究有助于深入了解ABA信号途径核心蛋白SnRK2调控种子灌浆和萌发的机制,对作物品质的改善和产量的提高具有重要意义。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Serine carboxypeptidase 46 Regulates Grain Filling and Seed Germination in Rice (Oryza sativa L.)
丝氨酸羧肽酶 46 调节水稻籽粒灌浆和种子萌发 (Oryza sativa L.)
DOI:10.1371/journal.pone.0159737
发表时间:2016-07-22
期刊:PLOS ONE
影响因子:3.7
作者:Li, Zhiyong;Tang, Liqun;Zhang, Jian
通讯作者:Zhang, Jian
A phosphoproteomic landscape of rice (Oryza sativa) tissues
水稻(Oryza sativa)组织的磷酸化蛋白质组学景观
DOI:10.1111/ppl.12574
发表时间:2017-08-01
期刊:PHYSIOLOGIA PLANTARUM
影响因子:6.4
作者:Wang,Yifeng;Tong,Xiaohong;Zhang,Jian
通讯作者:Zhang,Jian
A Quantitative Proteomic Analysis of Brassinosteroid-induced Protein Phosphorylation in Rice (Oryza sativa L.).
水稻 (Oryza sativa L.) 中油菜素类固醇诱导的蛋白质磷酸化的定量蛋白质组学分析
DOI:10.3389/fpls.2017.00514
发表时间:2017
期刊:Frontiers in plant science
影响因子:5.6
作者:Hou Y;Qiu J;Wang Y;Li Z;Zhao J;Tong X;Lin H;Zhang J
通讯作者:Zhang J
A Quantitative Acetylomic Analysis of Early Seed Development in Rice (Oryza sativa L.).
水稻早期种子发育的定量乙酰化分析(Oryza sativa L.)
DOI:10.3390/ijms18071376
发表时间:2017-06-27
期刊:International journal of molecular sciences
影响因子:5.6
作者:Wang Y;Hou Y;Qiu J;Li Z;Zhao J;Tong X;Zhang J
通讯作者:Zhang J
Mapping the N-linked glycosites of rice (Oryza sativa L.) germinating embryos.
绘制水稻 (Oryza sativa L.) 萌芽胚的 N 连接糖位点图谱
DOI:10.1371/journal.pone.0173853
发表时间:2017
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Ying J;Zhao J;Hou Y;Wang Y;Qiu J;Li Z;Tong X;Shi Z;Zhu J;Zhang J
通讯作者:Zhang J
水稻耐穗萌基因的挖掘与育种利用
- 批准号:U22A20456
- 项目类别:联合基金项目
- 资助金额:255.00万元
- 批准年份:2022
- 负责人:张健
- 依托单位:
种子特异表达NF-Y转录因子调控稻米品质的分子机制与网络研究
- 批准号:LZ21C130001
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:0.0万元
- 批准年份:2020
- 负责人:张健
- 依托单位:
KRPa基因调控水稻多胚生殖的机理与应用研究
- 批准号:32071986
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58万元
- 批准年份:2020
- 负责人:张健
- 依托单位:
水稻FYVE结构蛋白基因MS2调控花粉育性的分子机制研究
- 批准号:31871229
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:59.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:张健
- 依托单位:
国内基金
海外基金
