Funktionelle Bedeutung der intrazellulären Lokalisation von Proteinkinase D

Ziel des Projektes is es，die molekularen Grundlagen der durch PKD regulierten Signale des sekingischen Transport und der Zellmigration aufzuklären.在韦尔登复合物中识别PKD 1和PKD 2的脂质激酶PI 4激酶的生理学底物是一种非常重要的方法。Es wurde aber auch deutlich，dass Golgi-assoziierte PKD weitere，für den sekingischen Transport relevante Substrate haben muss.该底物溶液采用韦尔登进行鉴别。感兴趣的Kandidaten sind die drei weiteren in Säugerzellen vorkommenden PI4-Kinasen，PI4KIII <$，PI4KII <$und déren Regulation durch Proteinkinasen ebenfalls nahe liegt，bisher aber nicht gezeigt wurde. Die differentielle subzelluläre Lokalisation dieser Lipidkinasen deutet auf einen möglichen funktionellen Zusammenhang mit PKD hin. PI 4 KIII和PI 4 KII在Golgi Komplex lokalisiert中存在，在膜突起中存在PI 4 KII和Plasmamembran。我们也发现了PKD的有趣之处，这一独特的遗传学机制也对Zellmigration产生了明显的影响：将野生型PKD在Zellkultur-Modellhemmt三维模型中的表达与Zellen的迁移相结合，表达一种激酶缺陷的突变体，这种突变体在Folge中的迁移是明显的。Die Identifizierung neuer PKD Zielproteine sowie die Aufklärung der möglichen Regulation verseldener Lipidkinasen durch PKD und/oder PKC und deren funktionelle Relevanz für Sekretion bzw.移民将导致各种各样的项目。

Ziel des Projektes ist es, die molekularen Grundlagen der durch PKD regulierten Signale des sekretorischen Transport und der Zellmigration aufzuklären. Durch die Identifizierung der Lipidkinase PI4KIIIß als physiologisches Substrat von PKD1 und PKD2 am Golgi-Komplex konnte ein wichtiger Schritt in dem komplexen Prozess des sekretorischen Transports aufgeklärt werden. Es wurde aber auch deutlich, dass Golgi-assoziierte PKD weitere, für den sekretorischen Transport relevante Substrate haben muss. Diese Substrate sollen mittels verschiedener Methoden identifiziert werden. Interessante Kandidaten sind die drei weiteren in Säugerzellen vorkommenden PI4-Kinasen, PI4KIII¿, PI4KII¿ und ß, deren Regulation durch Proteinkinasen ebenfalls nahe liegt, bisher aber nicht gezeigt wurde. Die differentielle subzelluläre Lokalisation dieser Lipidkinasen deutet auf einen möglichen funktionellen Zusammenhang mit PKD hin. PI4KIII¿ und PI4KII¿ sind am Golgi Komplex lokalisiert, während PI4KIIß an der Plasmamembran in ¿membrane protrusions¿ vorzukommen scheint. Dort findet sich interessanterweise auch aktive PKD, die nach unseren eigenen Ergebnissen neben der Regulation der Sekretion auch die Zellmigration zu beeinflussen scheint: Während die Überexpression von Wildtyp PKD die Migration der Zellen in einem dreidimensionalen Zellkultur-Modell hemmt, hat die Expression einer kinase-defekten Mutante eine stark erhöhte Migration zur Folge. Die Identifizierung neuer PKD Zielproteine sowie die Aufklärung der möglichen Regulation verschiedener Lipidkinasen durch PKD und/oder PKC und deren funktionelle Relevanz für Sekretion bzw. Migration wird vorrangiges Ziel dieses Projektantrages sein.