Molekulare Charakterisierung des PKHD1-Gens und seines Proteins Polyductin bei der autosomal rezessiven polyzystischen Nierenerkrankung (ARPKD)

常染色体反应性多酶尼伦克兰氏病（ARPKD）是儿童和青少年中最常见的疾病。作为PKHD 1-Gen，我们在一个由一个已知的工作组鉴定的德国-美国联合体中发现了一个功能不全的4074氨基端蛋白质（多导蛋白/纤维囊蛋白）的基因和一个中性蛋白质。PKHD 1基因的86个外显子可通过多种选择性表达。T. organisspezifischen transskripten zusammengefügt.同种型的另一种功能是多导蛋白，它与Zystoproteine一样，是一种主要的脂肪和脂肪酶。Die Aufklärung seiner Funktion（en）ist damit für das Verständnis der Zystogenese von herausragender Bedeutung.Im vorgelegten Projekt sind auf der Basis des weltweit größten Kollektivs von z. Z.约900名家庭成员的临床特征研究：（1）PKHD 7-Gens的临床特征。(a)PKHD 7-Gens einschließlich differentiziell gespleißter Transkripte的特征，（B）Spleißmutationen和regulatorischer Elemente的特征，以及（c）PKHD f-突变谱在具有孤立性Kongenitaler Leberfibrose/ prädominanter Leberbeteiligung和sehr轻度betroffenen ARPKD患者中的特征。(2)Klonierung von GST-融合蛋白zur Antikörpererzeugung und Generierung einer Kristallstruktur für einzelne Polyductin-Domänen。(3)PKHD 1突变患者多导蛋白亚细胞定位的免疫组织化学研究。

Die autosomal rezessive polyzystische Nierenkrankheit (ARPKD) ist eine der wichtigsten Ursachen für Nierenversagen im Kindes- und Jugendalter. Das PKHD1-Gen, das wir im Rahmen eines deutsch-amerikanischen Konsortiums zeitgleich mit einer weiteren Arbeitsgruppe identifizieren konnten, ist eines der größten Gene und kodiert ein neuartiges Protein (Polyductin/ Fibrocystin) von 4074 Aminosäuren unbekannter Funktion. Die 86 Exons des PKHD1-Gens werden durch alternatives Spleißen zu vielen unterschiedlichen, z. T. organspezifischen Transkripten zusammengefügt. Weder Umfang noch Funktion von Isoformen sind bekannt Polyductin ist wie andere Zystoproteine im Bereich primärer Zilien und Zentrosomen lokalisiert. Die Aufklärung seiner Funktion(en) ist damit für das Verständnis der Zystogenese von herausragender Bedeutung.Im vorgelegten Projekt sind auf der Basis des weltweit größten Kollektivs von z. Z. ca. 900 klinisch gut charakterisierten Familien folgende Untersuchungen geplant: (1) Weitergehende Charakterisierung des PKHD7-Gens. (a) Charakterisierung des PKHD7-Gens einschließlich differenziell gespleißter Transkripte, (b) Charakterisierung von Spleißmutationen und regulatorischer Elemente, und (c) des PKHDf-Mutationsspektrums bei Patienten mit isolierter kongenitaler Leberfibrose/ prädominanter Leberbeteiligung und sehr mild betroffenen ARPKDPatienten. (2) Klonierung von GST-Fusionsproteinen zur Antikörpererzeugung und Generierung einer Kristallstruktur für einzelne Polyductin-Domänen. (3) Immunhistochemische Untersuchungen zur subzellulären Lokalisation von Polyductin bei Patienten mit nachgewiesenen PKHD1- Mutationen.