Molekularbiologische und proteinchemische Charakterisierung von Thiolproteinasen der einzelligen Parasiten Sarcocystis muris und Toxoplasma gondii (Apicomplexa)

在过去的几年里，寄生虫蛋白质的研究已经取得了很大进展。所以我知道了。韦尔登指出，巯基蛋白酶在寄生虫发育中起着重要作用。巯基蛋白酶的分子生物学和蛋白质化学特性对寄生虫种类的鉴定和高特异性蛋白酶抑制剂的产生有着重要的意义。“致密颗粒”）。用一种能使刚地弓形虫产生巯基蛋白酶的酶解弓形虫韦尔登。Bei diesen Untersuchungen sollen die entsprechenden Proteinasen molekulargenetisch charakterisiert，die zugehörigen Leserahmen in einen geeigneten Expressionsvektor inseriert und explanert韦尔登. Mit Hilfe von bereits etablierten Verfahren soll anschließend die Aufreinigung und funktionelle Charakterisierung der rekombinanten Enzyme erfolgen.因此，我们需要对寄生虫体内的巯基蛋白进行检测和定位。在“宿主-寄生虫界面”中使用免疫荧光和免疫电子显微镜检测韦尔登。

In den letzten Jahren hat die Erforschung von parasitären Proteinasen eine zunehmende Bedeutung erlangt. So konnte z.B. gezeigt werden, daß Thiol-Proteinasen eine zentrale Rolle bei der Entwicklung verschiedener Parasiten einnehmen. Die molekularbiologischen und proteinchemische Charakterisierung von Thiol-Proteinasen verschiedener Parasitenspezies und die Identifizierung hochspezifischer ProteinaseInhibitoren bilden die Voraussetzung für die Entwicklung innovativer Bekämpfungsmaßnahmen von Parasitosen.Das mit diesem Antrag angestrebte Forschungsvorhaben zielt auf die Klonierung und Expression der 26 kDa-Thiolproteinase aus den Dichten Granula (sog. "dense granules") von Sarcocystis muris-Cytenmerozoiten. Darüberhinaus sollen vergleichbare Arbeiten mit einer kreuzreagierenden Thiol-Proteinase von Toxoplasma gondii durchgeführt werden. Bei diesen Untersuchungen sollen die entsprechenden Proteinasen molekulargenetisch charakterisiert, die zugehörigen Leserahmen in einen geeigneten Expressionsvektor inseriert und exprimiert werden. Mit Hilfe von bereits etablierten Verfahren soll anschließend die Aufreinigung und funktionelle Charakterisierung der rekombinanten Enzyme erfolgen. Weiterhin soll die Entstehung und Lokalisation der ThiolProteinasen innerhalb der Parasiten bzw. im "host-parasiteinterface" mittels Immunofluoreszenzmikroskopie und Immunoelektronenmikroskopie aufgeklärt werden.