In vivo suppression of injury induced and uPAR regulated vascular smooth muscle cell migration using adenovirus-mediated gene transfer of dominant negative Janus kinases

Der vorliegende Antrag stellt eine Fortsetzung der gegenwärtigen Forschungsarbeit der Arbeitsgruppe über die Rolle der Serinprotease Urokinase（uPA）und ihrem specifischen Rezeptor（uPAR）bei der Pathogenese Kardiovaskulärer Erkrankungen dar. uPA通过与uPAR的结合，使其具有蛋白水解功能，但仅能使细胞内信号通路激活，从而促进细胞迁移和增殖。AG认为，JakStat Signalweg在uPA-抑制信号转导中扮演着重要角色，它可以在人体免疫系统（VSMC）中发挥作用，也可以在内皮细胞中发挥作用。VSMC中的信号通路与磷脂酰肌醇-3-激酶（PI 3-K）的作用密切相关。uPA诱导Janus-激酶Tyk 2的直接结合，并与调节PI 3-K的非特异性p85的Src同系物（SH”）结合，从而促进其活化。这是为了通过uPA管理迁移VSMC verantwortlich。基于AG假说，通过研究信号蛋白、uPA对VSMC迁移的调节作用，发现酪氨酸激酶Tyk 2、磷脂激酶PI 3-K和Rho家族的小GTP酶对VSMC迁移的调节作用最好，PI 3-K对细胞的重组和细胞迁移的影响也最大。Die Aufklärung der diesen Signalkaskaden zurundeliegenden molekularen Mechanismen wird neue Erkenntnisse über die Steuerung der Migration VSMC liefern und die Grundlagen für eine gezielte Signaltransduktiontherapie schaffen.

Der vorliegende Antrag stellt eine Fortsetzung der gegenwärtigen Forschungsarbeit der Arbeitsgruppe über die Rolle der Serinprotease Urokinase (uPA) und ihrem spezifischen Rezeptor (uPAR) bei der Pathogenese kardiovaskulärer Erkrankungen dar. uPA kan über seine proteolytische Funktion hinaus durch Bindung an den uPAR eine Vielzahl bisher nur unzureichend verstandener intrazelluläre Signalwege aktivieren, die zu Zellmigration und Proliferation führen. Die AG zeigte vor kurzem, dass der JakStat Signalweg eine wesentliche Rolle in der uPA-abhängigen Signaltransduktion sowohl in humanen glatten Gefäßmuskelzellen (VSMC), als auch in Endothelzellen spielt. Die neuen Ergebnisse weisen darauf hin, daß in VSMC dieser Signalweg funktionell mit dem der Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3-K) verknüpft ist. uPA induziert die direkte Bindung der Janus-Kinase Tyk2 an beide Src homologen Einheiten (SH") der regulatorischen Untereinheit p85 der PI3-K und führt zu deren Aktivierung. Diese ist für die durch uPA-gesteuerte Migration VSMC verantwortlich. Basierend darauf ergibt die Hypothese der AG, daß die Signalproteine, die uPA zur Regulation der Migration VSMC benutzt, aus der Tyrosinkinase Tyk2, der Lipidkinase PI3-K und kleinen GTPasen der Rho-Familie bestehen, die als Effektoren der PI3-K zu Zytoskelettreorganisation und Zellmigration führen. Die Aufklärung der diesen Signalkaskaden zugrundeliegenden molekularen Mechanismen wird neue Erkenntnisse über die Steuerung der Migration VSMC liefern und die Grundlagen für eine gezielte Signaltransduktionstherapie schaffen.