Funktionelle Charakterisierung der Maus SKD1-Proteine

Die grundabunden Mechanismen des Proteintransportes bei niederen Eukaryonten，wie der Bäckerhefe，sind vergleichbar mit den Vorgängen bei Säugerzellen.这一模型的建立，为研究真核细胞内Zellen蛋白质转运提供了有力的工具。因此，我们在Hefe中鉴定了一种蛋白质（Vps 4p），这是一种真核细胞内蛋白质转运的中心Schaltstelle。因此，Vps 4-蛋白质可以进行内吞作用，也可以进行前向和逆向的溶酶体蛋白质转运。Säugerzellen有两个VPs 4-Gen直系同源基因（SKD 1a和SKD 1b）。对于小鼠SKD 1a蛋白，我们可以观察到在溶酶体蛋白转运和内吞作用中的作用。通过两种绵羊SKD 1-基因在多个绵羊体内的表达，证实了两种绵羊SKD 1b-基因在健康绵羊体内的异源表达，我们将用多种生物学和生化方法研究绵羊SKD 1-基因的功能。我们想知道，如果在Zelle中发现两种SKD 1蛋白质，它们的生长和分子功能也会改变。从Beantwortung dieser Fragen erwarten wir wichtige Erkenntnisse zum molekularen Mechanismus des intrazellulären Proteintransportes bei Säugerzellen.

Die grundlegenden Mechanismen des Proteintransportes bei niederen Eukaryonten, wie der Bäckerhefe, sind vergleichbar mit den Vorgängen bei Säugerzellen. Dadurch ergibt sich die Möglichkeit, funktionelle Untersuchungen zum gezielten intrazellulären Proteintransport von eukaryontischen Zellen in einfacheren Modellsystemen zu studieren. So haben wir in der Hefe ein Protein identifiziert (Vps4p), das an einer zentralen Schaltstelle des intrazellulären Proteintransportes eukaryontischer Zellen agiert. Ohne das Vps4-Protein kommt die Endocytose und der anteriograde und retrograde Iysosomale Proteintransport einer Hefezelle zum Erliegen. Säugerzellen besitzen zwei zum VPs4-Gen orthologe Gene (SKD1a und SKD1b). Für das Maus SKD1a-Protein konnten wir zeigen, daß es in der Hefe in den lysosomalen Proteintransport und die Endocytose eingreift. Durch heterologe Expression des zweiten Maus SKD1b-Gens in der Hefe und durch Expression der zwei Maus SKD1-Gene in kultivierten Mauszellen, wollen wir die Funktion der Maus SKD1-Gene mit Hilfe zellbiologischer und biochemischer Methoden studieren. Wir wollen wissen, wo sich die zwei Maus SKD1-Proteine in der Zelle befinden, welche Aufgabe sie haben und welche molekulare Funktion sie ausüben. Aus der Beantwortung dieser Fragen erwarten wir wichtige Erkenntnisse zum molekularen Mechanismus des intrazellulären Proteintransportes bei Säugerzellen.