Genetische und molekulare Analyse der twisted dwarf-Mutante von Arabidopsis thaliana

Antrags的Ziel是拟南芥扭曲矮化突变体的一个特征。这是一种分子和遗传学方法，可以改变韦尔登，使其成为发展和提高遗传学水平的关键。Bisherige Arbeiten haben gezeigt，daß der Phänotyp der starken Reduktion des Streckenwachstums und der allgemeinen Desorientierung des Wachstums der Pflanze durch eine Mutation in einem rezessiven Gen hervorgerufen wird，das in seiner Aminosäuresequenz große hnlichkeit mit Immunophilinen aufweist。Diese Klasse von Proteinen spielt eine Rolle in der zellulären Proteinfaltung und Proteinstabilisierung（Peptid-Prolyl cis-transIsomerasen（PPIase））.在大肠杆菌中表达TWD-蛋白质，并在亲和层析中进行纯化，这也是体外纯化酶促激活PPIase的理想材料。Dexpressionsstudien über Reportergenkonstrukte soll die zeitliche wie räumliche Verteilung der Expression des TWD Genprodukts untersucht韦尔登. Mit Hilfe des 2-Hybridsystems in Hefe and Ansätzen zur Erzeugung und Isolierung von Suppressormutanten wird versucht，die zellulären Partner，die mit dem TWD-Protein specifisch interagieren，zu isolieren.

Das Ziel des Antrags ist die Charakterisierung der twisted dwarf Mutante aus Arabidopsis thaliana auf zellulärer und physiologischer Ebene. Es sollen hierbei molekulare und genetische Methoden angewandt werden, um die Rolle dieser Mutation für die Entwicklung und das Wachstum von Arabidopsispflanzen zu klären. Bisherige Arbeiten haben gezeigt, daß der Phänotyp der starken Reduktion des Streckenwachstums und der allgemeinen Desorientierung des Wachstums der Pflanze durch eine Mutation in einem rezessiven Gen hervorgerufen wird, das in seiner Aminosäuresequenz große Ähnlichkeit mit Immunophilinen aufweist. Diese Klasse von Proteinen spielt eine Rolle in der zellulären Proteinfaltung und Proteinstabilisierung (Peptid-Prolyl cis-transIsomerasen(PPIase)). Durch Überexpression des TWD-Proteins in E.coli und Aufreinigung über Affinitätssäulen wird versucht, ausreichend Material für in vitro Studien der enzymatischen Aktivität als PPIase zu gewinnen. Durch Expressionsstudien über Reportergenkonstrukte soll die zeitliche wie räumliche Verteilung der Expression des TWD-Genprodukts untersucht werden. Mit Hilfe des 2-Hybridsystems in Hefe und Ansätzen zur Erzeugung und Isolierung von Suppressormutanten wird versucht, die zellulären Partner, die mit dem TWD-Protein spezifisch interagieren, zu isolieren.