Charakterisierung der Bindung von Poly(A)-Bindungsprotein 2 an Poly(A) mittels Fluoreszenztitrationen: Abhängigkeit der Bindungsparameter von der Polymerlänge

Das Poly(A)- binding protein II (PABP2) aus Säugetieren spielt eine entscheidende Rolle bei der Längenkontrolle während合成des Poly(A)-Schwanzes der mrna。在体外versuche zeigen， daß der控制机制的研究进展，并在此基础上研究Poly(A)-Schwanzlänge。PABP2 binding stöchiometrisch and Poly(A) mit iner Bedeckungs-länge von ca. 15 Adenylatresten。电子显微技术和扫描力显微技术已被应用于7纳米Durchmesser和kugelförmige 21纳米Durchmesser gebildet werden。模具最大尺寸Partikelgröße冯21纳米风贝纳Poly(A)-Länge冯200-300纳米精度。新合成体系聚(A)在体内和体外的研究进展[j] . [Länge]。Ziel des beantragten Vorhabens ist es, die o.g. Befunde zur Partikelbildung mit iner unabhängigen验证方法：die intrinsische Fluoreszenz des PABP2 wind - durch binding and Poly(A) gelöscht。Über diese Fluoreszenzlöschung soll die结合部特性和die Abhängigkeit der热力学参数（Kass, wkoop, n） von der Poly(A)-Länge best estimmt werden。in Falle der Bildung eines definiten particles mit A250 wrde man erwarten， dasß sich mindestens einer der Parameter einer Länge von 250-300 nt显著ändert。

Das Poly(A)-Bindungsprotein II (PABP2) aus Säugetieren spielt eine entscheidende Rolle bei der Längenkontrolle während der Synthese des Poly(A)-Schwanzes der mRNAs. In vitro-Versuche zeigen, daß der Kontrollmechanismus eine echte Messung der Poly(A)-Schwanzlänge beinhaltet. PABP2 bindet stöchiometrisch an Poly(A) mit einer Bedeckungs-länge von ca. 15 Adenylatresten. Elektronenmikroskopie und Scanning Force Mikroskopie haben ergeben, daß dabei sowohl lineare Filamente von 7 nm Durchmesser als auch kugelförmige Partikel von 21 nm Durchmesser gebildet werden. Die maximale Partikelgröße von 21 nm wird bei einer Poly(A)-Länge von 200-300 nt erreicht. Da diese Länge der von neu synthetisiertem Poly(A) in vivo und in vitro entspricht, wird angenommen, daß die beobachteten Partikel Bestandteil der Längenkontrolle sind. Ziel des beantragten Vorhabens ist es, die o.g. Befunde zur Partikelbildung mit einer unabhängigen Methode zu verifizieren: Die intrinsische Fluoreszenz des PABP2 wird durch Bindung an Poly(A) gelöscht. Über diese Fluoreszenzlöschung soll die Bindung charakterisiert und die Abhängigkeit der thermodynamischen Parameter (Kass, wkoop, n) von der Poly(A)-Länge bestimmt werden. Im Falle der Bildung eines definierten Partikels mit A250 würde man erwarten, daß sich mindestens einer der Parameter bei einer Länge von 250-300 nt signifikant ändert.