Energetik- und Calcium-Regulation bei stimulierter Exocytose in Paramecium-Zellen

在草履虫-Zellen将得到Grigriggerte，Synchrone(0.1秒)出口开始von einem戏剧性的ATP-Verbrauch和der去磷ylierung eines磷酸蛋白von 63 kDa，PP63/Parafusin(PF)，和Zwar Strikt im Ausmasder Statfinden Excytose von“致密核心”-Vesikeln(“Trichocysten”)。Deses Wird gefolgt von langsamer(30秒)Reporylierung and Fülung des ATP-Pools(30秒)Reppylierung and Fülung des ATP-Pools(30秒)。观察PP63/PF存在于胞外，PP63/PF Nur存在于胞外；PP63/PF Nur来自胞外；大贝设置了一个四膜虫的实验，DASS的PP63脱磷脂的帽子，发现了我们的下游-有效的四膜虫。在KLonierungsarbeiten Zeigen，DASS PP63/PF鉴定为MIT磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和一种表达PGM的异构体。De Funktionelle Bedeutung der de-/re-Phocorylierung von PP63/PF/PGM in Strike Koppelung MIT DEM Excytoseablauf bleibt aufzuklären.Trotz der ubiquitären von PP63/PF bietSich Sich Unser系统在Besonderem masse zu分析和：Wegen seiner strikten Synchronizität(de-und re-Phophorylierung könnnen ohneúberlagerung analysiert)，der Möglichkeit einer räumlichen(免疫方法)和zeitlichen(猝灭流动)Zuordnung，der Isolierbarkeit与Komenenten und der Möglichkeit Functionkeller测试相关的体外和体内实验中的基因沉默和表达。美国能源管理协会--《胞外能量调节方案》。

In Paramecium-Zellen wird die getriggerte, synchrone (0.1 sec) Exocytose begleitet von einem dramatischen ATP-Verbrauch und der Dephosphorylierung eines Phosphoprotein von 63kDa, PP63/Parafusin (pf), und zwar strikt im Ausmass der stattfindenden Exocytose von "dense core"-Vesikeln ("Trichocysten"). Dieses wird gefolgt von langsamer (30 sec) Rephosphorylierung und Füllung des ATP-Pools. Obwohl PP63/pf in exo- Stämmen gleich vorhanden ist, wird PP63/pf nur in exocytosefähigen exo+ Stämmen dephosphoryliert, bei zeitlich versetzter Doppeltriggerung strikt im Ausmass der Assemblierung von Dock-/Fusionstellen bzw. der Trichocysten-Exocytose. Dabei setzen wir auf Grund von "Knock-out"-Experimenten an Tetrahymena voraus, dass die PP63 Dephosphorylierung nichts mit Membranfusion zutun hat, sondern nur "downstream"-Effekte bewirken kann. Unsere Klonierungsarbeiten zeigten, dass PP63/pf identisch ist mit Phosphoglukomutase (PGM) und auch nach heterologer Expression PGM Aktivität hat. Die funktionelle Bedeutung der De-/Re-Phosphorylierung von PP63/pf/PGM in strikter Koppelung mit dem Exocytoseablauf bleibt aufzuklären. Trotz der ubiquitären Verbreitung von PP63/pf bietet sich unser System in besonderem Masse zu Analyse an: Wegen seiner strikten Synchronizität (De- und Re-Phopsphorylierung können ohne Überlagerung analysiert werden), der Möglichkeit einer räumlichen (Immunmethoden) und zeitlichen (Quenched-flow) Zuordnung, der Isolierbarkeit der relevanten Komponenenten und der Möglichkeit funktioneller Tests in vitro und in vivo unter Einschluss von "Gene silencing" und Überexpression. Unsere Arbeiten zielen u.a. auf Mikrodomänen-Regulation energetischer Prozesse des Exocytoseablaufes.