Energie-dispersive Röntgenmikroanalyse (EDX) der Calcium-Dynamik bei Paramecium tetraurelia Zellen

定量EDX-分析von Ca，evtl.im Austausch MIT sr，während Dynamischer zellulärer Prozesse im Sub-Sekundenbereich wurde von von-mittels熄灭流动和Gefrier替代(Unter Me2+Retentionsbedingungen)以及定量方法表(Hardt und Plattner，eingereicht，a，b；Anlage)。Nun Sollen folgende basale zellbiologische ASpekte am Moell der Parecium-Zelle untersuht：(I)Ganz-Zell钙映射同步器胞外(80ms)和内胞质(350ms)自动多胺(AED-)刺激Hin，(Ii)Verlaf der Ca-Entleerung Aus亚浆emMalen Ca-Speichern be toppelgerung(Coffein&GT；AED)füreinen Drerekten in原位测试Eines的存储操作的钙内流‘，(Iii)Wiederfülung der Speicher nach der Vorgabe in(Ii)，(Iv)Ca-Dynamik beDe De Depolierter cilien-Schlagumkehr通过钙离子的流入而产生纤毛-纤毛-Schlagumkehr-Kanäle der Cilienmenan and die Reetablierung der Ca-Homöostase(fofene Franach Verteilung von Ca-Kanälen and Ca-Pumpe in cilien)。-Für(i-III)是钙离子-内流-失败，这是一个重要的突变D6，für(Iv)de Mutante d4-500R(ohne ciliäre Ca-Kanäle)bzw.es stehen auchedopelmuanten zur Verfügung。注：EDX erlabt die Messung des gesamten Ca，[Ca]，bzw.der Ca-Flose ALS Vorossetzung für lokale Reguling der Freien Ionalen Ca~(2+)-Konzendation，[Ca~(2+)]。

Die quantitative EDX-Analyse von Ca, evtl. im Austausch mit Sr, während dynamischer zellulärer Prozesse im Sub-Sekundenbereich wurde von uns mittels Quenched-flow und Gefriersubstitution (unter Me2+ Retentionsbedingungen) als quantitative Methode etabliert (Hardt und Plattner, eingereicht, a, b; Anlage). Nun sollen folgende basale zellbiologische Aspekte am Modell der Paramecium-Zelle untersucht werden: (i) Ganz-Zell Ca-Mapping während synchroner Exocytose (80 ms) und Endocytose (350 ms) auf Polyamin- (AED-) Stimulation hin, (ii) Verlauf der Ca-Entleerung aus subplasmalemmalen Ca-Speichern bei Doppeltriggerung (Coffein > AED) für einen direkten in situ-Test eines 'store-operated Ca2+-Influx', (iii) Wiederfüllung der Speicher nach der Vorgabe in (ii), (iv) Ca-Dynamik bei Depolarisations-induzierter Cilien-Schlagumkehr via Ca2+-Influx über spannungsabhängige Ca-Kanäle der Cilienmembran und die Reetablierung der Ca-Homöostase (offene Frage nach Verteilung von Ca-Kanälen und Ca-Pumpe in Cilien). - Für (i-iii) steht die Ca2+-Influx-defekte, nicht AED-reaktive Mutante nd6, für (iv) die Mutante d4-500r (ohne ciliäre Ca-Kanäle) bzw. es stehen auch Doppelmutanten zur Verfügung. NB: EDX erlaubt die Messung des gesamten Ca, [Ca], bzw. der Ca-Fluxe als Voraussetzung für lokale Regulation der freien ionalen Ca2+-Konzentration, [Ca2+].