Charakterisierung bakterieller Ribonuklease P sowie der tRNA-Prozessierung in Aquifex aeolicus

(1) <s:1> rzwei inder Arbeitsgruppe etablierte modelsysteme der bakteriellen核糖核酸酶P （RNase P) sollen folgende schlselaspekte bebeitet werden; (1) <s:1> RNase P与枯草芽孢杆菌B型）：welche strucktureigenschaften des RNase P-蛋白在体内的功能，welche defkte der Prozessierung von tRNA- and Nicht tRNA- transklten treten beverderter intrazellulärer RNase P- konzenation auf und welche weiteren zellulären Faktoren sind mitdem酶在体内的关联？(2) <s:1>耐热性RNase P- us Thermus thermoophilus (type A): die Charakterisierung der außergewöhnlichen -在体内表达的RNase P- proteins， die Untersuchung der untereinheitenstruckturr（二聚体，四聚体？），结晶学的研究和分析的热力学和动力学参数的rna - protein - interakschen Parameter der der Bildung des holo酶。<s:1> β - RNase P-Holoenzyme sollen mitels uv - industriter Quervernetzungen rna - protein - kontaktstellisieret。(3)研究结果表明：<s:1>超嗜热细菌Aquifex aeolicus， in dem bisher einzigartig keine RNase P gefunden wurde, soll die tRNA-5´-Maturierungsaktivität und - je nach Entwicklung des Projekts - auch andere schlsselenzyme der tRNA-Biogenese identifiziert and charakterisierwerden。本文主要研究生物化学方法、“蛋白质组学”和“基因组学”的结合。

Für zwei in der Arbeitsgruppe etablierte Modellsysteme der bakteriellen Ribonuklease P (RNase P) sollen folgende Schlüsselaspekte bearbeitet werden: (1) für die RNase P aus Bacillus subtilis Typ B): welche Struktureigenschaften des RNase P-Proteins bestimmen die Funktion in vivo, welche Defekte der Prozessierung von tRNA- und Nicht tRNA-Transkripten treten bei verinderter intrazellulärer RNase P-Konzentration auf und welche weiteren zellulären Faktoren sind mit dem Enzym in vivo assoziiert? (2) für die thermostabile RNase P aus Thermus thermophilus (Typ A): die Charakterisierung der außergewöhnlichen in vivo-Expression des RNase P-Proteins, die Untersuchung der Untereinheitenstruktur (Dimer, Tetramer?), Kristallisationsstudien sowie die Analyse der thermodynamischen und kinetischen Parameter der RNA-Protein-Interaktion bei der Bildung des Holoenzyms. Für beide RNase P-Holoenzyme sollen mittels UV-induzierter Quervernetzungen RNA-Protein-Kontaktstellen lokalisiert werden. (3) Für das hyperthermophile Bakterium Aquifex aeolicus, in dem bisher einzigartig keine RNase P gefunden wurde, soll die tRNA-5´-Maturierungsaktivität und - je nach Entwicklung des Projekts - auch andere Schlüsselenzyme der tRNA-Biogenese identifiziert und charakterisiert werden. Hier ist die Anwendung einer Kombination aus biochemischen Methoden, "Proteomics" und "RNomics" geplant.