Mechanismen der Integrinaktivierung und Integrin-vermittelten Signaltransduktion am Beispiel des tumorbiologisch relevanten Integrins Alpha-Ny-Beta-3 (gem. mit RE 1156/3-2 und KE 147/39-2)

[3] [Krebsgeschehen kommt . dem Integrin αvß3] [j], [j] [j] .增殖、迁移与入侵工业学报。]Die diesen Prozessen zugrunde liegenden intrazellulären信号转导机制的研究表明，分子/结构的研究表明，信号转导机制的研究表明，分子/结构的研究表明，信号转导机制是未知的。荷兰分子动力学研究所（dldynamische rechungen konnten wir zeigen）， dass die stabilste α/ß- integrink构象der des二聚体蛋白Glykophorin A weitgehendentspright。darber china在nahesu allen Integrinketten in trans - membrane motif （GXXXG,A oder T）中鉴定出了一种具有特异性的基因，并将其命名为<s:1>二聚体（Dimerisierung des Glykophorin A essentiell）。Da diese Ergebnisse bisislang nur Rechenmodelle darstellen, soll in vorliegend beantragten Projekt， die Rolle der transmembranen und zytosolischen Integrindomänen beer der αvß3-Aktivierung and avß3-vermittelten信号转导<e:1> berpritwerden。Folgende Ziele werden angestrebt: 1。α - v- und的序列/结构决定因子<e:1>与α - v- und的异型关联ß3-Transmembrandomänen。2. 2 .建立稳定剂tumor - zelltransfektanten mit mutagenisierten Transmembrandomänen zum Studium der Auswirkungen aufdie αvß - 3- aktivierung and intrazelluläre信号转导。3 .合成干扰素αvß3-选择性受体rgd -寡聚物αvß3-簇性受体Zelloberfläche与细胞信号转导。表达zytosolischer Integrindomänen fr NMR-Analysen zur struckturrellen Charakterisierung der molek<e:1> lbereiche， die nach Drehung der跨膜Domänen和Interaktion mit Zytoskelettproteinen之间的光信号。5. 分子建模与Langzeit molek<e:1> ldynamik- rechungen zur Klärung der molecular cularen Details f<e:1> r跨膜Konformationsänderungen。

Im Krebsgeschehen kommt dem Integrin αvß3 eine besondere Rolle zu, da es nach Aktivierung durch einen Liganden der Extrazellulärmatrix, die zelluläre Adhäsion, Proliferation, Migration und Invasion induziert. Die diesen Prozessen zugrunde liegenden intrazellulären Signaltransduktionsmechanismen werden oftmals sehr vereinfachend als Integrinkonformationsänderungen bezeichnet, sind aber auf molekularer/struktureller Ebene weitgehend unverstanden. Durch moleküldynamische Rechnungen konnten wir zeigen, dass die stabilste α/ß-Integrinkonformation der des dimeren Proteins Glykophorin A weitgehend entspricht. Darüber hinaus identifizierten wir in nahezu allen Integrinketten ein transmembranes Motiv (GXXXG,A oder T), das für die Dimerisierung des Glykophorin A essentiell ist. Da diese Ergebnisse bislang nur Rechenmodelle darstellen, soll im vorliegend beantragten Projekt, die Rolle der transmembranen und zytosolischen Integrindomänen bei der αvß3-Aktivierung und avß3-vermittelten Signaltransduktion überprüft werden. Folgende Ziele werden angestrebt: 1. Charakterisierung der Sequenz-/Struktur-Determinanten für homo- und heterotypische Assoziationen der αv- und ß3-Transmembrandomänen. 2. Etablierung stabiler Tumorzelltransfektanten mit mutagenisierten Transmembrandomänen zum Studium der Auswirkungen auf die αvß3-Aktivierung und intrazelluläre Signaltransduktion. 3. Untersuchung der Effekte synthetischer αvß3-selektiver RGD-Oligomere auf das αvß3-Clustern auf der Zelloberfläche und die Signaltransduktion. 4. Expression zytosolischer Integrindomänen für NMR-Analysen zur strukturellen Charakterisierung der Molekülbereiche, die nach Drehung der transmembranen Domänen an der Interaktion mit Zytoskelettproteinen beteiligt sind. 5. Molekulares Modelling und Langzeit Moleküldynamik-Rechnungen zur Klärung der molekularen Details für transmembrane Konformationsänderungen.