Humanized models to assess the genotoxicity of viral vectors in the context of hematopoietic stem cell expansion and in vivo selection

人源化模型在造血干细胞扩增和体内选择的背景下评估病毒载体的遗传毒性

• 批准号: 133411872
• 负责人: Professor Dr. Thomas Moritz
• 金额: --
• 依托单位: Institut Experimentelle Hämatologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2008-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/133411872?language=en
• 关键词: Humanized; models; assess; genotoxicity; viral

Trotz der bekannten Unterschiede zwischen der humanen und der murinen Hämatopoese erfolgt die präklinische Analyse des genotoxischen Risikopotentials der Gentherapie mit hämatopoetischen Zellen zurzeit nahezu ausschließlich in murinen Modellen. Um diese Lücke zu schließen, schlagen wir die Entwicklung von Modellen zur Analyse dieses Risikopotentials direkt in den relevanten humanen Zielzellen vor. Diese Modelle beruhen zum einen auf der Xenotransplantation humaner Zellen in immundefiziente Mäuse (humanisiertes NOD/SCID/IL2rγnull Modell), zum anderen auf der In-vitro-Proliferations- und Replattierungskapazität insertionell aktivierter humaner blutbildender Zellen (In-vitro- Immortalisierungsassay). Diese Modelle sollen dann eingesetzt werden, um die Sicherheit retroviraler Gentransferverfahren bei gleichzeitiger (i) Wachstumsfaktor-mediierter In-vitro- Expansion sowie (ii) pharmakologischer In-vivo-Selektion der genetisch modifizierten Zellen zu analysieren.

通过建立小鼠模型，对采用高剂量Zellen的基因治疗的遗传毒性风险潜能进行初步分析，以了解人类和小鼠的遗传毒性。在此基础上，我们对模型进行了改进，分析了相关人类Zielzellen的直接风险潜力。该模型建立了一个在免疫缺陷小鼠中进行异种移植的人Zellen模型（humanisiertes NOD/SCID/IL 2 r γnull Modell），并建立了体外扩增和再移植的人血细胞移植（In-vitro- Immortalisierungsassay）模型。该模型通过韦尔登，将逆转录病毒的遗传转移转化为（i）载体体外扩增（ii）药物体内选择的遗传修饰Zellen进行分析。