Strukturbestimmung von Proteorhodopsin mittels NMR Spektroskopie

膜蛋白使结构生物学的大Herausforderungen变得更加重要。它的结构测量是一个非常复杂的过程，许多膜蛋白质在实验系统中很容易被吸收，所以晶体的衍射也很容易被NMR光谱吸收。在过去的几年里，我们已经认识到，表达问题是通过在韦尔登地区使用一个自由表达系统来解决的。在此基础上，我们对核磁共振反应的方法进行了改进，使核磁共振反应的活性同位素在实验中得到了韦尔登，从而使核磁共振实验中的共振现象得到了明显的改善。数据分析师是我们的möglich，也größere膜蛋白strukturell zu untersuchen。在这些预处理的Antrag中，我们使用Flüssig-NMR Spektroskopie检测视紫红质的结构。用核磁共振谱法测定化学分散液中的视紫红质含量。在信息方面，韦尔登将使用SAIL氨基标记蛋白质，并使用核磁共振技术检测蛋白质。Diese Strukturuntersuchungen韦尔登die Basis für eine detaillierte Untersuchung der Konformationen angeregter Zustände liefern.

Membranproteine stellen derzeit eine der großen Herausforderungen der Strukturbiologie dar. Ihre Strukturbestimmung wird zum einen dadurch erschwert, dass viele Membranproteine sich nur sehr schlecht in zellulären Systemen exprimieren lassen und zum anderen dadurch, dass sowohl diffraktierende Kristalle als auch gut aufgelöste NMR Spektren nur schwer zu erhalten sind. In den letzten Jahren haben wir gezeigt, dass wenigstens das Expressionsproblem durch die Verwendung eines zellfreien Expressionssystems in sehr vielen Fällen gelöst werden kann. Basierend auf diesem zellfreien Expressionssystem haben wir Methoden entwickelt, mit denen NMR-aktive Isotope in bestimmten Mustern eingeführt werden können, die die Resonanzzuordung in NMR Experimenten erheblich erleichtern. Dadurch ist es uns möglich, auch größere Membranproteine strukturell zu untersuchen. In dem vorliegenden Antrag beschreiben wir die geplante Strukturuntersuchung von Proteorhodopsin mittels Flüssig-NMR Spektroskopie. NMR-Spektren des Proteorhodopsin zeigen eine hervorragende Dispersion der chemischen Verschiebungen. Um Informationen über die Seitenketten zu erhalten, werden wir das Protein mit SAIL Aminosäuren markieren, die es erlauben, auch große Proteine mittels NMR zu untersuchen. Diese Strukturuntersuchungen werden die Basis für eine detaillierte Untersuchung der Konformationen angeregter Zustände liefern.