Strukturbestimmung von Proteorhodopsin mittels NMR Spektroskopie

膜蛋白stellenderzeit derzeit der gros ßen Herausforderungen der Strukturbiologie dar。[3] strukturestimung wind zum einen derdersch schwert， ass viele膜蛋白sich ich derdersch in zellulären Systemen exprieren lassen and zum anderdersch， ass sowol diffraction atierende Kristalle als auch in aufgelöste NMR Spektren nur schwerzu erhalten sin。在den letzten Jahren haben wir gezeigight中，pass wenigens das Expressionsproblem中的Verwendung eines zellfreen expressionssystem中的sehr vielen Fällen gelöst werden kann。在核磁共振实验中建立了一种基于核磁共振活性同位素的核磁共振表达体系，在核磁共振实验中建立了核磁共振活性同位素体系，在核磁共振实验中建立了核磁共振活性同位素体系。dadurchist的研究结果是möglich，每个größere膜蛋白结构都是相同的。在dem vorliegenden Antrag， beschreiben与die geplante， Strukturuntersuchung von Proteorhodopsin mittel， flsigg - nmr光谱。核磁共振成像技术研究蛋白质紫红蛋白的特性。1 . e . Informationen ber die Seitenketten zu erhalten, werden wir das Protein mit SAIL Aminosäuren markekien, werden wir ß ße Protein mittelels NMR zu intersuchen。disese struckturuntersuchungen werden die Basis f<s:1> rine detaillierte tersuchung der formationen angeregter Zustände liefern。

Membranproteine stellen derzeit eine der großen Herausforderungen der Strukturbiologie dar. Ihre Strukturbestimmung wird zum einen dadurch erschwert, dass viele Membranproteine sich nur sehr schlecht in zellulären Systemen exprimieren lassen und zum anderen dadurch, dass sowohl diffraktierende Kristalle als auch gut aufgelöste NMR Spektren nur schwer zu erhalten sind. In den letzten Jahren haben wir gezeigt, dass wenigstens das Expressionsproblem durch die Verwendung eines zellfreien Expressionssystems in sehr vielen Fällen gelöst werden kann. Basierend auf diesem zellfreien Expressionssystem haben wir Methoden entwickelt, mit denen NMR-aktive Isotope in bestimmten Mustern eingeführt werden können, die die Resonanzzuordung in NMR Experimenten erheblich erleichtern. Dadurch ist es uns möglich, auch größere Membranproteine strukturell zu untersuchen. In dem vorliegenden Antrag beschreiben wir die geplante Strukturuntersuchung von Proteorhodopsin mittels Flüssig-NMR Spektroskopie. NMR-Spektren des Proteorhodopsin zeigen eine hervorragende Dispersion der chemischen Verschiebungen. Um Informationen über die Seitenketten zu erhalten, werden wir das Protein mit SAIL Aminosäuren markieren, die es erlauben, auch große Proteine mittels NMR zu untersuchen. Diese Strukturuntersuchungen werden die Basis für eine detaillierte Untersuchung der Konformationen angeregter Zustände liefern.