GYF-Domänen-vermittelte Protein-Wechselwirkungen

GYF-Domänen Komassifizieren eine in Eukaryonten vorkommende Familie von Protein-Interaktionsdonänen，die Prolm-Reiche Sequenzen(PRS)erkennen.甘氨酸-酪氨酸-苯丙氨酸(GYF)是甘氨酸-酪氨酸-苯丙氨酸(GYF)的三肽，它们是甘氨酸-酪氨酸-苯丙氨酸(GYF)的主要成分。DEM蛋白CD2BP2中的GYF-Domäne wurde与CD2结合。Entsprechend wurde CD2 in den Kontext der CD2-ABHänGigen T-Zell-SignalTransduktion Wellt.我们在书房中发现了一种新的分析方法，那就是用核磁共振波谱分析技术分析机械设备。合作伙伴Einiger GYF-Domänen-Enteine verifieren。如果你是我的朋友，你会得到你的帮助，你会得到你的帮助。在T-Zell-Signal转导和Komplexen Aufklären剪接中，CD2BP2-GYF-蛋白与CD2BP2-GYF-蛋白相关。CD2BP2在T-Zellen溶液中的功能在siRNA实验中进行，并与白介素2的合成和磷脂酰肌醇结合。Werde werde wir dabe MIT primären T-Zellen CD2-Transgener Mäuse duchführen.在剪接体Komplexe soll dch konfokale Mikroskopie and fret-analych von CFP/YFP-Fusionen MIT den entsprerechenden GYFAVW-Proteinen and deren BindungsPartnern er forschtden，komplementär wirktroopisch and spktroopisch and biPhysikattsunch terucen，die mikroskischischisch e mikroskischischisch and biPhysikattsunch teruchenen，domplementärn wirktrokopisch and biPhysikattsunch teruch，dum mikroskischischischisch d dtrissche Modelzle zuän gän n ffp-Fusionen MIT den End Enchenden GYVW-Proteinen and deren BindungsPartner n erschnden，komänen NMR-Spektroopisch and biPhysikattunsunch ternen等。Domäne des Hefe-SMY2-蛋白质剪接-蛋白质MSL5和Zum Anderen den Translationsfaktor EAP1 ALS InterfactionsPartner gefunden haben，wollen wire in diesem einen möglichen Zusammenang dieseser beiden Prozesse Aufklären.在此之前，我们在S的基础上，从CD2BP2-GYFDOMäne到CD2BP2-GYFDomäne-GYFDomäne-GYFDOMäne eine in Vergleich zur CD2BP2-GYFDomäne eine in Vergleich zur CD2BP2-GYFDOMäne eine in Vergleich zur CD2BP2-GYFDOMä核磁共振-Strukturder SMY2-GYF-Domäne im Komplex MIT einem natürlichen Liganden soll Gelöst，um die feststerellten Bindungseigenschaften auf struktureller Ebene zu verstehen.在GYF-Domänen Prs-unabhängie Proteil-Bindungseigenschaften Bitzt，kann die neueren Erkenntnissen Dieser C-Terminale，nht-konservierte teil der GYF-Domänen prs-unabhängie Proteil-Bindungseigenschaften beitzt，kann die StrukTurn ALS Ausangspunkt für die Charakterisierung Neuer GYF-Domänen-BindungsPartner dienen。

GYF-Domänen klassifizieren eine in Eukaryonten vorkommende Familie von Protein- Interaktionsdomänen, die Prolm-reiche Sequenzen (PRS) erkennen. Das konservierte Tripeptid Glycin-Tyrosin-Phenylalanin (GYF) ist dabei Teil eines konservierten Strukturmotifs, das insbesondere unter Einbindung vieler aromatischer Aminosäuren zur Bindung des Liganden beiträgt. Die erste GYF-Domäne wurde in dem Protein CD2BP2 identifiziert und vermittelt die Bindung an CD2. Entsprechend wurde CD2 in den Kontext der CD2-abhängigen T-Zell- Signaltransduktion gestellt. Wir haben in den letzten Jahren die erste Struktur eines GYFDomänen- Ligandenkompl exes mittels NMR-Spektroskopie gelöst und für repräsentative GYFDomänen aus Hefe, der Acker-Schmalwand (A. thaliana) und Mensch eine umfassende Analyse der Mechanismen zur Erkennung von Prolin-reichen Sequenzen durchgeführt. Dabei konnten wir mit Hilfe des Phage Display und mittels der Hefe-Zwei-Hybrid-Analyse wahrscheinliche zelluläre Interaktionspartner einiger GYF-Domänen-enthaltender Proteine verifizieren. Dieser Antrag hat nun zum Ziel, die neu gefundenen Interaktionen von GYF-Domänen zu charakterisieren und den möglichen funktionellen Zusammenhang, in dem GYF-Domänen eine Rolle spielen, weitergehend zu untersuchen. Insbesondere wollen wir die relative Bedeutung des CD2BP2-GYF-Proteins in der T-Zell-Signaltransduktion und in spliceosomalen Komplexen aufklären. Die Funktion des CD2BP2 in T-Zellen soll durch siRNA-Experimente in Kombination mit der Messung von Interleukin-2-Produktion und Phosphorylierungsmustern untersucht werden. Weitergehende Experimente werde wir dabei mit primären T-Zellen CD2- transgener Mäuse durchführen. Die vermutete Einbindung von GYF- und WW-Domänenenthaltenden Proteinen in spliceosomale Komplexe soll durch konfokale Mikroskopie und FRET-Analyse von CFP/YFP-Fusionen mit den entsprechenden GYFAVW-Proteinen und deren Bindungspartnern erforscht werden, Komplementär werden wir die Wechselwirkung der beteiligten Protein-Domänen NMR-spektroskopisch und biophysikattsch untersuchen, um die mikroskopischen Experimente durch mechanistische Modelle zu ergänzen und um herauszufinden, ob die Interaktionspartner unabhängig, kompetitiv oder kooperativ binden. Da wir für die GYF-Domäne des Hefe-SMY2-Proteins zum einen das Splicing-Protein MSL5 und zum anderen den Translationsfaktor EAP1 als Interaktionspartner gefunden haben, wollen wir in diesem Fall einen möglichen Zusammenhang dieser beiden Prozesse aufklären. Strukturell soll hier geklärt werden, inwieweit die S M Y2-GYF-Domäne, die im Vergleich zur CD2BP2-GYFDomäne eine veränderte C-terminale Domänengrenze aufweist, einen unterschiedlichen Faltungsmodus besitzt. Die NMR-Struktur der SMY2-GYF-Domäne im Komplex mit einem natürlichen Liganden soll gelöst, um die festgestellten Bindungseigenschaften auf struktureller Ebene zu verstehen. Da nach neueren Erkenntnissen dieser C-terminale, nicht-konservierte Teil der GYF-Domänen PRS-unabhängige Protein-Bindungseigenschaften besitzt, kann die Struktur als Ausgangspunkt für die Charakterisierung neuer GYF-Domänen-Bindungspartner dienen.