Echtzeitbeobachtung des Doppelmotors in einer einzelnen F0F1-ATP Synthase: Abbilden von Rotor-Elastizität und Stator-Nachgiebigkeit anhand von Dreifarben-FRET
Echtzeitbeobachtung des Doppelmotors in einer einzelnen F0F1-ATP Synthase: Abbilden von Rotor-Elastizität und Stator-Nachgiebigkeit anhand von Dreifarben-FRET
批准号:
27748066
负责人:
Professor Dr. Michael Börsch
金额:
$0.0万
依托单位国家:
德国
项目类别:
Research Grants
财政年份:
2006
资助国家:
德国
项目状态:
已结题
起止时间:
2005-12-31 至 2013-12-31
中文摘要
在异源基因Verteilung酶制剂Zustände的情况下,我们可以从异源基因中识别出不同的亚群,从而实现同步。线粒体、叶绿体和白细胞膜中的FF1-ATP合成酶。合成这些von ATP am F1-teil des Enzyms是一种运输von Protonenüber模膜的机制,持续时间为fo-teil gekoppelt。这是他们的工作,也是他们的工作,也不是他们的工作,而是他们的工作。他说:“这是一种自给自足的方式。在此基础上,这一次,这只是一个旋转的环,在一个准连续的,这是一个很好的解决方案,bzw。谁将是10-双-14-对称,并在他(bzww.sechsfache)对称的方向,不是吗?这句话的意思是:转身时,你会不会发现,你是不是也不知道该怎么做?在这样的4个形态未成形的实验中,我们发现了一种新的方法,即在4种不同形态的Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer(FRET)实验中,对Escherichia colimithilein einer Einzigen或eine konzertierte bewegung einer Einzigen c-Untereinheit-Her-Her-Bewegung eine lokale Einzigen e ininzigle Einziger e ininzigle Einzigen c-Untereinheit-Her-Her-Bewewgung eine lokale eine einziger e ininziger e-Unterezigh-Her-Her-Bewegggsart einer einer einzigen e ininziger e inzige e inzigen c-Untereinheit-Her-Beweggung e lokale e inzigen e inzigen e e inzigen e inzigen c-Untereinheiten c-Untereinheiten-Her-Bewegung-Her-Bewegungung e eine einzige e-Unterezig他说:“我不想再做任何事情了,我不会再做任何事情了。”大贝将偏振的荧光标记分离出来,使ATP水解酶和ATP合成。
英文摘要
Untersuchungen am einzelnen Enzym erlauben die Identifikation von Subpopulationen im Fall einer heterogenen Verteilung enzymatischer Zustände, ohne die Notwendigkeit einer Synchronisation. FoF1-ATP Synthase katalysiert die Bildung von ATP in den Membranen der Mitochondrien, Chloroplasten und Bakterien. Die Synthese von ATP am F1-Teil des Enzyms ist mechanisch an den Transport von Protonen über die Membran durch den Fo-Teil gekoppelt. Es wird gegenwärtig angenommen, dass diese Kopplung durch zwei unterschiedliche Arten von Rotationsbewegungen innerhalb des Enzyms erfolgt. Verschiedene Hypothesen über diese Rotationsbewegungen zwischen und innerhalb der Untereinheiten wurden aufgestellt. Unter anderen sind zwei Fragestellungen unbeantwortet:Erstens, ist die Rotation eines Rings von c-Untereinheiten in Fo ein quasi-kontinuierliche Bewegung oder liegt eine schrittweise Bewegung vor, bzw. wie wird die 10-bis-14-fache Symmetrie durch die Anordnung der c-Untereinheiten in die dreifache (bzw. sechsfache) Symmetrie der Orientierungen der ¿-Untereinheit übersetzt ? Zweitens, kommt es während der Protonenaufnahme und -abgabe zu einer Hin-und-her-Bewegung ( swiveling ) in einer der beiden transmembranen Helices in derjenigen c-Untereinheit, die direkt zur a-Untereinheit benachbart ist? Ist diese Hin-und-her-Bewegung eine lokale Bewegungsart einer einzigen c-Untereinheit oder eine konzertierte Bewegung in allen c-Untereinheiten gleichzeitig ?Wir werden die Rotationsbewegungen einer c-Untereinheit innerhalb des Fo-Teils von FoF1-ATP Synthase aus Escherichia coli mithilfe eines zeitaufgelösten Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) Experiments in 4¿-Konfiguration untersuchen. Um die Hin-und-her-Bewegung einer Helix innerhalb einer c-Untereinheit zu beobachten, wird das FRET Experiment mit einem Anisotropie-Experiment mit abwechselnd gepulster Anregung kombiniert. Dabei wird die polarisierte Fluoreszenz des einen Labels separat gemessen, sowohl während ATP Hydrolyse als auch ATP Synthese.
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批准号:253407113
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项目类别:Priority Programmes
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负责人:Professor Dr. Michael Börsch
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