Echtzeitbeobachtung des Doppelmotors in einer einzelnen F0F1-ATP Synthase: Abbilden von Rotor-Elastizität und Stator-Nachgiebigkeit anhand von Dreifarben-FRET

实时观察单个 F0F1-ATP 合酶中的双电机：使用三色 FRET 绘制转子弹性和定子顺应性

• 批准号: 27748066
• 负责人: Professor Dr. Michael Börsch
• 金额: --
• 依托单位: Department of Microbiology and Immunology
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/27748066?language=en
• 关键词: Echtzeitbeobachtung; des; Doppelmotors; einer; einzelnen

Untersuchungen am einzelnen Enzym erlauben die Identifikation von Subpopulationen im Fall einer heterogenen Verteilung enzymatischer Zustände, ohne die Notwendigkeit einer Synchronisation. FoF1-ATP Synthase katalysiert die Bildung von ATP in den Membranen der Mitochondrien, Chloroplasten und Bakterien. Die Synthese von ATP am F1-Teil des Enzyms ist mechanisch an den Transport von Protonen über die Membran durch den Fo-Teil gekoppelt. Es wird gegenwärtig angenommen, dass diese Kopplung durch zwei unterschiedliche Arten von Rotationsbewegungen innerhalb des Enzyms erfolgt. Verschiedene Hypothesen über diese Rotationsbewegungen zwischen und innerhalb der Untereinheiten wurden aufgestellt. Unter anderen sind zwei Fragestellungen unbeantwortet:Erstens, ist die Rotation eines Rings von c-Untereinheiten in Fo ein quasi-kontinuierliche Bewegung oder liegt eine schrittweise Bewegung vor, bzw. wie wird die 10-bis-14-fache Symmetrie durch die Anordnung der c-Untereinheiten in die dreifache (bzw. sechsfache) Symmetrie der Orientierungen der ¿-Untereinheit übersetzt ? Zweitens, kommt es während der Protonenaufnahme und -abgabe zu einer Hin-und-her-Bewegung ( swiveling ) in einer der beiden transmembranen Helices in derjenigen c-Untereinheit, die direkt zur a-Untereinheit benachbart ist? Ist diese Hin-und-her-Bewegung eine lokale Bewegungsart einer einzigen c-Untereinheit oder eine konzertierte Bewegung in allen c-Untereinheiten gleichzeitig ?Wir werden die Rotationsbewegungen einer c-Untereinheit innerhalb des Fo-Teils von FoF1-ATP Synthase aus Escherichia coli mithilfe eines zeitaufgelösten Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer (FRET) Experiments in 4¿-Konfiguration untersuchen. Um die Hin-und-her-Bewegung einer Helix innerhalb einer c-Untereinheit zu beobachten, wird das FRET Experiment mit einem Anisotropie-Experiment mit abwechselnd gepulster Anregung kombiniert. Dabei wird die polarisierte Fluoreszenz des einen Labels separat gemessen, sowohl während ATP Hydrolyse als auch ATP Synthese.

Untersuchungen am einzelnen酶erlauben die亚群的鉴定in Fall einer异种verilung酶atischer Zustände， ohne die not endigkeit einer Synchronisation。FoF1-ATP合成酶催化线粒体、叶绿体和细菌膜中ATP的生成。ATP在F1-Teil - des酶机制下的合成和质子的转运。[3] [endnoteref: 1] [endnoteref: 1] [endnoteref: 1] [endnoteref: 1] [endnoteref: 1] [endnoteref: 1]。Verschiedene假说：<s:1>伯氏病- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -unbeantwortet:Erstens， i die Rotation eines Rings of c- unbeantwortet in fin准连续连续（quasi- kontintinureurei - untintinureche - beweung - schrittwees - beweung - verth）；10- 2 -14面对称模、c-非对称模（bzw）。对称的定向-对称的定向-对称的定向？Zweitens, kommt es während der Protonenaufnahme and -abgabe zu einer Hin-und-her-Bewegung（旋转）in einer der跨膜螺旋in derjenigen c-Untereinheit， die direckt zur a-Untereinheit benachbart ist？1 .中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：中文翻译：Wir werden die Rotationsbewegungen einer c-Untereinheit， innerhalb des o- teils von FoF1-ATP合成酶，Escherichia coli mithilfe eines zeitaufgelösten einzelmolekl -荧光-共振-能量转移（FRET）实验在4¿-配置条件下。Um die hinund -her- bewegung - einer Helix innerhalb - einer c-Untereinheit zu bebeachten, wind as FRET Experiment mit einem anisotropm - experimental mit abwegseldster Anregung kombiniert。大北风能die polarisierte Fluoreszenz des einen标签分离gemessen， sowohl während ATP水解也可以合成ATP。