权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Kontrolle des Rotationsmechanismus einer einzelnen FoF1-ATP synthase in freitragenden Lipiddoppelschichten

自支撑脂质双层中单个 FoF1-ATP 合酶旋转机制的控制

基本信息

批准号：
196663069
负责人：
Professor Dr. Michael Börsch
金额：
--
依托单位：
Arbeitsgruppe Mikroskopie-Methodik
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
2011
资助国家：
德国
起止时间：
2010-12-31 至 2015-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/196663069?language=en
关键词：
Kontrolle des Rotationsmechanismus einer einzelnen

项目摘要

FoF1-ATP Synthasen produzieren und erhalten das [ATP]-Niveau in Zellen mithilfe einer internen Rotation von Untereinheiten. In Escherichia coli wird das Enzym durch die Protonen-motorische Kraft, PMF, angetrieben, die aus zwei Komponenten besteht: der Konzentrationsdifferenz von Protonen (ΔpH) und dem elektrischen Potential (Δψ) über die Membran. Rotation während der ATP Synthese wurde in vitro bei hohen ΔpH- und unbekannten Δψ-Werten nachgewiesen. In vivo ist der ΔpH-Wert klein und Δψ soll die treibende Kraft zur ATP Synthese sein. Demnach könnten die korrespondierenden ATP Syntheseraten deutlich kleiner sein. Wir wollen die spezifischen Rollen von ΔpH und Δψ quantitativ in Bezug auf die Rotationsmechanik messen. Im ersten Schritt werden wir unsere konfokale Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer Methode zur Beobachtung der Rotation in einzelnen FoF1-ATP Synthasen mit der neuen 'black-lipid-membrane patch clamp'-Technik unseres Kooperationspartners kombinieren, die die Diffusion von Membranproteinen auf etwa 10 nm begrenzt. Konfokales Laserscanning und zeitkorrelierte Einzelphotonenzählung erlauben somit die Beoachtung von PMF-kontrollierter Rotation in einer einzelnen FoF1-ATP Synthase auf allen Zeitskalen von Nanosekunden bis Minuten für ATP Hydrolyse und Synthese ohne Oberflächenanbindung. Die Ergebnisse werden mit Messungen an rekonstituierten FoF1-ATP Synthasen verglichen, die im 'ABELtrap' (Anti-Brownian electrokintic trap) festgehalten werden.

在Zellen mithilfe einer in zellen mithilfe einer von Untereinheiten中，ff1-ATP合成产品和erhalten das[ATP]-niveau。在大肠杆菌中，对质子酶的耐受性包括硫酸盐、PMF、Angetrieben、Auszwei Komponenten(ΔpH)和DEM Electrktrischen Potential(Δψ)。ΔpH-和Δψ-Werten nachgewiesen体外合成的旋转波。在体内，ΔpH-Wert Klein和ΔψSoll die treibende Kraft zur ATP合成这些sein。作者声明：Demnach könnten die korpondierenden ATP Syntherten deutlich Kleiner sein.Wir wollen Diviischen Rollen vonΔpH和Δψ在Bezug auf模具旋转机械信息中的定量。Im ersten Schritt Will Unsere Konfokale Einzelmolekül-Fluoreszenz-Resonanz-Energie-Transfer Methode zur Beobachtung der旋转在Einzelnen FoF1-ATPSynthasen MIT der Neuen‘Non-Liped-Mage Mit der Neuen’-Technik disseres Kooperation sPartners Kombinieren，die Diffulation von Memmenteen auf wwa 10 nm Bgrenzen。在Einzelnen FoF1-ATP合成酶von Nanosekunden bis Minuten für ATP水解酶和合成这些ohne Oberflächenanbindung中，Konfokales Laserscans和zeitkorrelerte EinzelPhoonenzähloben Somit die Beoachtung von PMF-kontrollier旋转。MIT Messungen是一种新的F1-ATP合成酶，它是一种反布朗电动陷阱(ABELTrap)。