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ヘテロクロマチンを形成するヒストンメチル化酵素のin vitro解析

形成异染色质的组蛋白甲基转移酶的体外分析

基本信息

批准号：
21J11467
负责人：
大角健
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

真核生物のゲノムDNAは、ヌクレオソームを基本としたクロマチン構造として核内に収納されている。クロマチンは構成するヒストンのメチル化状態によって、ユークロマチンとヘテロクロマチンに分類される。ヘテロクロマチンは転写が不活発で、ユークロマチンと異なるDNA損傷修復機構が働くが、その詳細な機能は明らかではない。一方で、ヘテロクロマチンでは、転写と共役した機構でのDNA損傷修復が行われていることが示唆されている。そこで本研究では、ヘテロクロマチンの機能の一端を明らかにすべく、クロマチン上の転写と修復機構をin vitro再構成系によって解析することを目的とした。本年度は、DNA損傷修復機構の一つである転写共役修復に着目して解析した。損傷によって停止したRNAポリメラーゼII（RNAPII）-ヌクレオソーム複合体の立体構造を解析し、転写共役修復のメカニズムを明らかにすることを目指した。このため、異なる位置の損傷を含むヌクレオソームを再構成し、試験管内で転写反応を実施した。種々の条件検討の結果、クライオ電子顕微鏡解析により停止したRNAPII-ヌクレオソーム複合体の画像データを得た。そして、それらの立体構造を部分的に決定することに成功した。現在、多様なRNAPII-ヌクレオソーム複合体の構造を得るために、クライオ電子顕微鏡解析を継続中である。本研究により、ヘテロクロマチン上でのDNA損傷認識や、転写反応とゲノム維持機構との相互作用に関する新たな知見が得られ、ヘテロクロマチンの機能を理解する上で重要な情報が得られることが期待される。

Eukaryotic organisms DNA DNA, DNA structure, basic structure, and nuclear storage structure.クロマチンは constitutes the するヒストンのメチル化state によって、ユークロマチンとヘテロクロマチンにClassificationされる. D NA damage repair mechanism, detailed function, and function. One side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side, one side, one side, one side, and one side, one side, one side.そこで本研究では, ヘテロクロマチンのfunctional one end を明らかにすべく, クロマチン上の転WRits and repair mechanism をin The in vitro reconstruction system is analyzed and analyzed for the purpose of analysis. This year, we will write about the analysis of the DNA damage repair mechanism and the purpose of the joint repair. Damage によって stop したRNA ポリメラーゼII (RNAPII) - ヌクレオソームrepair The analysis of the combined three-dimensional structure and the restoration of the three-dimensional structure of the 転WRITING joint service are as follows.このため, the damage of the different なる position is included in the むヌクレオソームを reconstituted し, and the で転 in the test tube is written as a した. The results of various conditions were investigated, and the image of the RNAPII-ヌクレオソーム complex was obtained based on the analysis of the electronic microscope using a クライオ electron microscopy. The success of the part of the three-dimensional structure and the three-dimensional structure of the structure determines the success. Now, the structure of the multi-RNAPII-ヌクレオソーム complex has been analyzed and analyzed using a クライelectronic microscope. This study focuses on the understanding of DNA damage and the interaction between the maintenance mechanism and the maintenance mechanism of DNA damage.る新たな知见が得られ、ヘテロクロマチンの function をUnderstanding する上でimportantなinformationがgetられることがLooking forward to される.