ダイズシストセンチュウ防除を目指した宿主認識行動制御技術の確立

本年度は、昨年度解析したGCYとTAX-2遺伝子についてより詳細な解析を行なった。公開されているダイズシストセンチュウゲノムからGCYのホモログを検索したところ３つのホモログを見出した。二期幼虫での発現量を確認したところ、どれもGCYに比べて発現量が低かったこと、GCYをRNAiで発現抑制した際の３種のホモログの発現量は変化なかったことから二期幼虫でGCYが主要な機能を担っていると予想された。続いてダイズシストセンチュウと近縁のジャガイモシストセンチュウおよび同じ植物寄生線虫であるサツマイモネコブセンチュウでホモログを探索し、同様にRNAiで発現抑制を行なった。発現抑制体での宿主根への誘引を確認したところ、どちらもGCYを発現抑制した個体では宿主根への誘引率が低下していたことから、GCYは他の植物寄生線虫でも宿主認識に重要な遺伝子であると考えられた。サツマイモネコブセンチュウは糖や塩類などさまざまな物質に誘引されることが知られており、また種子ムシゲルやポリアミンが植物由来の誘引物質として知られている。GCY発現抑制ネコブセンチュウを用いてこれらの物質への誘引活性を評価した結果、ポリアミンへの誘引活性のみ顕著に低下していることを見出した。以上の結果からGCYはネコブセンチュウの宿主認識においてポリアミンの認識に重要な遺伝子であることが明らかとなった。また、GCYを用いた化合物スクリーニング系構築のためにGCYの動物細胞での安定発現株の構築を開始し安定発現株を得た。TAX-2発現抑制ダイズシストセンチュウを用いて、さまざまな宿主根への誘引活性を評価したところ、全ての宿主根への誘引が低下していた。さらに高温や低温への忌避活性、硝酸イオンへの誘引活性もTAX-2発現抑制体では低下していたことから、TAX-2はC.elegansと同じく種々の行動を制御する遺伝子であると考えられた。

本年度は、昨年度解析したGCYとTAX-2遺伝子についてより詳細な解析を行なった。公開されているダイズシストセンチュウゲノムからGCYのホモログを検索したところ３つのホモログを見出した。二期幼虫での発現量を確認したところ、どれもGCYに比べて発現量が低かったこと、GCYをRNAiで発現抑制した際の３種のホモログの発現量は変化なかったことから二期幼虫でGCYが主要な機能を担っていると予想された。続いてダイズシストセンチュウと近縁のジャガイモシストセンチュウおよび同じ植物寄生線虫であるサツマイモネコブセンチュウでホモログを探索し、同様にRNAiで発現抑制を行なった。発現抑制体での宿主根への誘引を確認したところ、どちらもGCYを発現抑制した個体では宿主根への誘引率が低下していたことから、GCYは他の植物寄生線虫でも宿主認識に重要な遺伝子であると考えられた。サツマイモネコブセンチュウは糖や塩類などさまざまな物質に誘引されることが知られており、また種子ムシゲルやポリアミンが植物由来の誘引物質として知られている。GCY発現抑制ネコブセンチュウを用いてこれらの物質への誘引活性を評価した結果、ポリアミンへの誘引活性のみ顕著に低下していることを見出した。以上の結果からGCYはネコブセンチュウの宿主認識においてポリアミンの認識に重要な遺伝子であることが明らかとなった。また、GCYを用いた化合物スクリーニング系構築のためにGCYの動物細胞での安定発現株の構築を開始し安定発現株を得た。TAX-2発現抑制ダイズシストセンチュウを用いて、さまざまな宿主根への誘引活性を評価したところ、全ての宿主根への誘引が低下していた。さらに高温や低温への忌避活性、硝酸イオンへの誘引活性もTAX-2発現抑制体では低下していたことから、TAX-2はC.elegansと同じく種々の行動を制御する遺伝子であると考えられた。