長鎖ノンコーディングRNA Malat1による分枝形態形成の調節機構の解明

长非编码RNA Malat1阐明分支形态发生的调控机制

• 批准号: 21K06762
• 负责人: 林 徹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06762/
• 关键词: Malat1; 顎下腺; RNA; 形態形成; 長鎖ノンコーディングRNA; 分枝形態形成

上皮が枝分かれを繰り返しながら伸長していく形づくりの様式は分枝形態形成と呼ばれ、そのモデル器官としては胎仔マウスの顎下腺が知られています。研究代表者はこれまでに胎仔マウス顎下腺を材料とし、遺伝子の発現レベルを調節するRNA（具体的には、タンパク質をコードしないノンコーディングRNA）が分枝形態形成に与える影響について調べてきました。本研究課題ではノンコーディングRNAのうち、200塩基以上の長鎖RNAを研究対象としています。Malat1は長鎖ノンコーディングRNAのひとつですが、分枝形態形成に関与することは知られていません。そのような中、予備実験にてMalat1が分枝形態形成を調節しうること見出しました。そこで当該年度はMalat1のin situ hybridization による局在解析を中心に進めました。方法としてはまず、Malat1の塩基配列をデータベースから取得し、プライマーを作成しました。つぎに作成したプライマーを用いてMalat1 転写産物の一部と相補的に結合するプローブを合成しました。一方、胎仔マウス顎下腺については急速凍結させて薄い切片を用意しました。プローブを切片に滴下し反応させると、Malat1が発現している細胞や組織が青く染色されます（in situ hybridization）。その結果、顎下腺の発生ステージによってMalat1の発現レベルや発現部位が大きく変動することが示唆されました。このことから分枝形態形成をはじめとする顎下腺の発生過程にMalat1が寄与している可能性が考えられます。

The epithelial branches are branched, elongated, shaped, and branched. The fetal hypognathal glands are branched. The study's representatives are interested in the regulation of RNA in the development of fetal submandibular gland materials and genes (specific RNA) and the regulation of branch morphology. This research topic focuses on the study of long-locked RNA with more than 200 bases. Malat1 is a long chain of RNA. It is related to the formation of branching morphology. In addition, the formation of branch morphology is regulated by the preparation of Malat1. When Malat1 of the year is in situ hybridization, the bureau is in the center of analysis. The method is to create a base configuration for Malat1. A part of the product is made up of Malat and Malat. A side, fetus, submandibular gland, rapid freezing, thin slice, intention The cells and tissues were stained in situ hybridization. As a result, the development of the mandibular gland was affected by the development of Malat1, which was affected by the large number of changes in the development site. The possibility of formation of submandibular gland is examined.