「がん遺伝子DUSP4」の新規基質同定と治療応用

“癌基因DUSP4”的新型底物鉴定及治疗应用

• 批准号: 21K06888
• 负责人: 守山 正胤
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Oita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06888/
• 关键词: DUSP4; がん遺伝子; 大腸癌; 近位依存性ビオチン標識法; 新規基質; 分子標的治療

DUSP4は、がん遺伝子であるMAPキナーゼを不活化する脱リン酸化酵素として機能する。さまざまな癌腫でDUSP4の発現低下とそれに伴うMAPキナーゼの恒常的活性化が認められる。私たちは、膵癌前駆病変が浸潤性膵癌に進展する際にDUSP4の欠失と発現低下が高頻度に認められることを報告した。さらに大腸癌が深部浸潤する過程で、DUSP4が発現低下してMAPキナーゼが活性化することを報告した。一方、癌腫によってはDUSP4が高発現しているものもあり、癌細胞の増殖能亢進や抗がん剤抵抗性、上皮間葉転換などに関わることが報告されている。私たちも大腸癌の特定の亜型では、DUSP4が高発現していること、DUSP4の発現抑制により増殖能が低下することを報告した。以上の知見に基づきDUSP4ががん遺伝子として機能する際の分子メカニズムを解明するため、近位依存性ビオチン標識 (BioID)法による新規基質の同定を試みた。これまでに、DUSP4とビオチンリガーゼ(BirA)の融合タンパクを発現するプラスミドを構築した。次にそれをDUSP4高発現大腸癌細胞株HCT116に導入して、DUSP4-BirA融合タンパク安定発現細胞株を2株樹立した。これらの細胞株にビオチンを添加し、20時間後の細胞抽出液を電気泳動して、HRP標識ストレプトアビジンでビオチン化タンパクを確認すると、複数のバンドが検出された。目的とするDUSP4の新規基質は、これらのDUSP4-BirA融合タンパクによってビオチン化されたタンパクの中に存在することが強く示唆される。

DUSP4 is a protein that is activated by MAP. The low occurrence of DUSP4 in cancer is accompanied by the constant activation of MAP. DUSP4 is missing and appears frequently when invasive cancer progresses. DUSP4 was found to be lower during the process of deep invasion of colorectal cancer, and MAP was found to be activated. One side, cancer cell proliferation, resistance, epithelial mesenchymal transformation, high incidence of DUSP4, high incidence of cancer cell proliferation, high incidence, high incidence of cancer cell proliferation, high incidence, high incidence of cancer cell proliferation, high incidence, high incidence of cancer cell proliferation, high incidence, high incidence, high incidence of cancer cell proliferation, high incidence, high incidence In certain types of colorectal cancer, DUSP4 was found to be high, and DUSP4 was found to be inhibited. The above findings are based on the DUSP4, which is a new method for determining the identity of a new substrate based on the proximity dependent identification (BioID) method. This is the first time that DUSP4 and BirA have been able to create a platform for integration. DUSP4-BirA fusion protein was introduced into HCT116 cells and two stable HCT116 cells were established. The cell extract was electrophoresis after 20 hours, and the HRP identification was confirmed. Objective: The new matrix of DUSP4-BirA fusion system has been developed.

项目成果

Involvement of clusterin expression in the refractory response of pancreatic cancer cells to a MEK inhibitor.

• DOI: 10.1111/cas.15735
• 发表时间: 2023-05
• 期刊: Cancer science
• 影响因子: 5.7

Enhanced phosphorylation of c-Jun by cisplatin treatment as a potential predictive biomarker for cisplatin response in combination with patient-derived tumor organoids.

顺铂治疗增强了 c-Jun 的磷酸化，作为与患者来源的肿瘤类器官相结合的顺铂反应的潜在预测生物标志物。

• DOI: 10.1038/s41374-022-00827-2
• 发表时间: 2022
• 期刊: Lab Invest.
• 作者: Tsukamoto Y;Kurogi S;Shibata T;Suzuki K;Hirashita Y;Fumoto S;Yano S;Yanagihara K;Nakada C;Mieno F;Kinoshita K;Fuchino T;Mizukami K;Ueda Y;Etoh T;Uchida T;Hanada T;Takekawa M;Daa T;Shirao K;Hironaka S;Murakami K;Inomata M;Hijiya N;M
• 通讯作者: M

ZNF395の発現低下はJNKの不活性化を介して膵癌細胞の増殖を促進する

ZNF395 表达减少通过 JNK 失活促进胰腺癌细胞增殖

• 发表时间: 2021
• 作者: 黒木 秀作;泥谷 直樹;塚本 善之;中田 知里;猪股 雅史;小林 隆志;守山 正胤
• 通讯作者: 守山 正胤

Early response in phosphorylation of ribosomal protein S6 is associated with sensitivity to trametinib in colorectal cancer cells

• DOI: 10.1038/s41374-021-00590-w
• 发表时间: 2021-04-28
• 期刊: LABORATORY INVESTIGATION
• 影响因子: 5
• 作者: Hirashita, Yuka;Tsukamoto, Yoshiyuki;Murakami, Kazunari
• 通讯作者: Murakami, Kazunari

c-Junリン酸化亢進はシスプラチン感受性と相関する

c-Jun 磷酸化与顺铂敏感性相关

• 发表时间: 2021
• 作者: 塚本 善之;柴田 智隆;麓 祥一;黒木 秀作;平下 有香;柳原 五吉;矢野 信次;中田 知里;泥谷 直樹;衛藤 剛;廣中 秀一;村上 和成;猪股 雅史;守山 正胤
• 通讯作者: 守山 正胤