ヒト悪性腫瘍におけるBCL6蛋白質発現の意義に関する分子病理学的研究

BCL6蛋白表达在人类恶性肿瘤中意义的分子病理学研究

• 批准号: 08877037
• 负责人: 守山 正胤
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877037/
• 关键词: BCL-6; Zinc finger; 転写因子; 悪性リンパ腫; 染色体転座; MAP kinase; リン酸化

1)BCL6蛋白質を特異的に認識する抗体を作製し,同蛋白質の同定を試み,BCL6蛋白質が92-98kDのリン酸化核蛋白質であること,リンパ装置のgerminal center B-cellに強く発現しているが,mantle zoneならびにmarginal zoneのB-cellや,plasma cellには殆ど発現していないことを見いだした.すなわち,B-cell lineageではある特定の分化段階で発現することが明きらかとなった.さらに悪性リンパ腫におけるBCL6蛋白質を観察したところ,diffuse large cell lymphoma(DLB), follicular lymphoma(FL), Burkitt lymphomaではBCL6遺伝子の再構成の有無にかかわらずほとんどの症例で強い発現を認めた(Blood, 86, 28, 1995)。2)他の血球細胞における発現を調べたところ、ヒト急性骨髄性白血病の一部で発現を認めた。これらの症例は単球性細胞の形質を持つものが多いことから、単球性分化とBCL-6蛋白質発現に相関があるのではないかと考え、promonocytic cell line U-937細胞をTPA刺激により単球性の分化を誘導したところ、BCL-6の発現も誘導されることが見いだされた(Leukemia, in press)。3)BCL-6蛋白質のアミノ酸配列にMAP kinase(MARK)の基質となりうる配列を多数みられたため、精製したMAPKを用いてin vitro kinase反応実験を行ったところ、BCL-6蛋白質が強くリン酸化された。さらにBCL-6蛋白質をtransientに発現させたfibroblastを用いてin vivoにおけるリン酸化実験を行ったところ、in vivoにおいてもBCL-6はMAPKの基質となりうることがわかった。そこでさらにBCL-6を生理的に発現するB-cellを用いてMAPK pathwayを活性化させるとリン酸化は高まったが、このリン酸化はMAPKK inhibitorにより抑制された(Oncogene,in press)。

1) Specific recognition of BCL6 protein, antibody production, identification of the same protein,BCL6 protein from 92-98kD and nuclear protein, strong detection in germinal center B-cell,mantle zone and marginal zone B-cell,plasma cell. B-cell lineages appear at specific differentiation levels. BCL6 protein has been detected in the presence or absence of BCL6 gene recombination,diffuse large cell lymphoma(DLB), follicular lymphoma(FL), Burkitt lymphoma (Blood, 86, 28, 1995). 2)A part of acute osteoblastic leukemia is recognized. These symptoms are related to the development of BCL-6 protein and the differentiation of BCL-6 protein.(Leukemia, in press). 3)BCL-6 protein is highly acidic due to the presence of MAP kinase(MARK) in the matrix and the presence of MAPK in the vitro kinase reaction. BCL-6 protein is transient, fibroblast is expressed in vivo, and BCL-6 MAPK is expressed in vivo. Also, B-cells are used to activate the MAPK pathway for physiological expression of BCL-6, and this phosphorylation is inhibited by the MAPKK inhibitor (Oncogene,in press).

项目成果

M,Moriyama: "BCL-6 is phosphorylated at multiple sites in its serine and proline clustered region by mitogen-activated prtotein kinases in vivo" Oncogene. (in press).

M，Moriyama：“BCL-6 在其丝氨酸和脯氨酸簇区域的多个位点被体内丝裂原激活的蛋白激酶磷酸化”Oncogene。

T.Yamochi: "Regulation of BCL-6 gene expression in human myeloid/monocytoid leukemia cells" Leukemia. (in press).

T.Yamochi：“人骨髓/单核细胞白血病细胞中 BCL-6 基因表达的调节”白血病。