ヒト悪性腫瘍におけるBCL6蛋白質発現の意義に関する分子病理学的研究

BCL6蛋白表达在人类恶性肿瘤中意义的分子病理学研究

基本信息

批准号：
08877037
负责人：
守山正胤
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877037/
关键词：
BCL-6 Zinc finger 転写因子悪性リンパ腫染色体転座 MAP kinase リン酸化

项目摘要

1)BCL6蛋白質を特異的に認識する抗体を作製し,同蛋白質の同定を試み,BCL6蛋白質が92-98kDのリン酸化核蛋白質であること,リンパ装置のgerminal center B-cellに強く発現しているが,mantle zoneならびにmarginal zoneのB-cellや,plasma cellには殆ど発現していないことを見いだした.すなわち,B-cell lineageではある特定の分化段階で発現することが明きらかとなった.さらに悪性リンパ腫におけるBCL6蛋白質を観察したところ,diffuse large cell lymphoma(DLB), follicular lymphoma(FL), Burkitt lymphomaではBCL6遺伝子の再構成の有無にかかわらずほとんどの症例で強い発現を認めた(Blood, 86, 28, 1995)。2)他の血球細胞における発現を調べたところ、ヒト急性骨髄性白血病の一部で発現を認めた。これらの症例は単球性細胞の形質を持つものが多いことから、単球性分化とBCL-6蛋白質発現に相関があるのではないかと考え、promonocytic cell line U-937細胞をTPA刺激により単球性の分化を誘導したところ、BCL-6の発現も誘導されることが見いだされた(Leukemia, in press)。3)BCL-6蛋白質のアミノ酸配列にMAP kinase(MARK)の基質となりうる配列を多数みられたため、精製したMAPKを用いてin vitro kinase反応実験を行ったところ、BCL-6蛋白質が強くリン酸化された。さらにBCL-6蛋白質をtransientに発現させたfibroblastを用いてin vivoにおけるリン酸化実験を行ったところ、in vivoにおいてもBCL-6はMAPKの基質となりうることがわかった。そこでさらにBCL-6を生理的に発現するB-cellを用いてMAPK pathwayを活性化させるとリン酸化は高まったが、このリン酸化はMAPKK inhibitorにより抑制された(Oncogene,in press)。

1）我们产生了一种特异性识别Bcl6蛋白的抗体，并试图鉴定蛋白质，发现Bcl6蛋白是92-98KD磷酸化的核蛋白蛋白，并且在淋巴机的生发中心B-center中强烈表达，但在Marginal区域和Marginal born byn b-cell of Marginal b-cell of Marginal b-cell or or表达。换句话说，它揭示了它在某个分化阶段在B细胞谱系中表达。此外，当我们观察到恶性淋巴瘤中的Bcl6蛋白时，我们在大多数情况下发现了弥漫性大细胞淋巴瘤（DLB），卵泡淋巴瘤（FL）和Burkitt淋巴瘤的强烈表达（血液，86，28，1995）。 2）当检查其他血细胞中的表达时，在某些人类急性髓样白血病中观察到表达。由于这些病例中的许多病例具有单核细胞性状，因此人们认为单核细胞分化与BCL-6蛋白表达之间可能存在相关性，并且当诱导TPA刺激引起tPA刺激的单核细胞分化时，也发现BCL-6表达也被诱导（Perse）。 3）由于在Bcl-6蛋白的氨基酸序列中发现了可能是MAP激酶底物的许多序列，因此使用纯化的MAPK进行了体外激酶反应实验，因此Bcl-6蛋白被强烈磷酸化。此外，使用成纤维细胞进行体内磷酸化实验，该实验是通过瞬时表达Bcl-6蛋白在短暂表达的，并且发现BCl-6也可以用作MAPK IN VIVO的底物。此外，当使用B细胞激活MAPK途径（在生理上表达BCl-6）时，磷酸化增加了，但是这种磷酸化被MAPKK抑制剂抑制（Oncogene，印刷中）。