多発性骨髄腫におけるスプライソソーム発現制御機構の解明と治療への応用

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【目的】多発性骨髄腫（MM）は形質細胞の悪性腫瘍であり未だ治癒が困難な難治性血液腫瘍である。そのため新たな治療戦略の開発が必要不可欠である。そこで我々は、MMに対する新たな治療標的としてスプライソソームに注目した。スプライソソームはRNAが成熟する際に生じるスプライシングに関与するタンパク－RNA複合体であり、様々な分子が同定されている。スプライソソームの異常はがんなどの様々な疾患に関与することが知られており、治療標的としても注目されている。今回の研究では、スプライソソーム遺伝子の発現ならびに関連遺伝子の発現をMM細胞株を用いて解析した。またsiRNAを用いてスプライソソーム遺伝子をノックダウンした際のMM細胞株における遺伝子発現、細胞増殖の変化等について検討した。【方法】MM細胞株におけるスプライソソーム遺伝子の発現解析にはRT-qPCR法を用いた。発現量は内在性コントロールのACTBを用いてΔCt法にて解析した。siRNAによる検討では、Lipofectamineを用いてsiRNAをMM細胞株に導入し、任意の時間培養後、遺伝子発現解析、細胞増殖試験などの各種解析を行った。【結果】MM細胞株において、スプライソソーム遺伝子であるHNRNPA2B1、SRSF2が高発現していた。HNRNPA2B1、SRSF2とがん遺伝子であるMYCとの発現の相関を解析したところ、それぞれ相関係数r＝0.723、r＝0.747と強い正の相関を認めた。HNRNPA2B1のノックダウンによってMYCの発現の減少を認め、一部のMM細胞株では細胞増殖が抑制された。【結論】MM細胞株において高発現しているスプライソソーム遺伝子が同定され、それら遺伝子の発現ががん遺伝子であるMYCの発現と関連していることが示唆された。さらにHNRNPA2B1の発現増加がMM細胞の増殖亢進と関連している可能性が示唆された。