Molecular therapy of replication-competent adenoviruses targeting characteristic gene mutations found in mesothelioma

针对间皮瘤中发现的特征基因突变的具有复制能力的腺病毒的分子疗法

• 批准号: 21K08199
• 负责人: 田川 雅敏
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08199/
• 关键词: 悪性中皮腫; p53経路; アデノウイルス; 細胞死; MDM2; FAK経路; MDM2分子; 遺伝子; 癌; シグナル伝達; バイオテクノロジー

悪性中皮腫は予後不良で、従来の枠組みでの治療法では有効性が乏しいため、新規治療開発は喫緊の課題である。一方ゲノム解析によって、同疾患には特徴的な遺伝子変異が存在することが明らかされ、本研究ではこの変異を利用して当該治療研究を実施した。悪性中皮腫ではp53が正常型でINK4A/ARF領域の欠損しているため、p14およびp16分子発現がなく、p53経路が機能的に不活化している。そこで、増殖型でp53分子の発現を高める組換えアデノウイルス（Ad-E1B）を用いると、感染した悪性中皮腫細胞に細胞死が誘導された。このときAdの初期応答遺伝子であるE1A分子・p53分子・同分子のリン酸化発現は増強していたが、さらにp53分子のユビキチン化を担うMDM2分子の阻害剤であるnutlin-3aを併用すると、相乗的な抗腫瘍効果が得られた。併用時に上記分子の発現はさらに増加していたため、p53経路の活性化が当該相乗効果に関与していることが示唆された。そこでこれを確認するために、p53分子の発現をsi-RNAを用いてノックダウンすると、Ad-E1B単独による細胞傷害活性は維持されていたが、MDM2阻害剤併用による相乗効果は消失した。さらにp53遺伝子が変異型の細胞では、MDM2阻害剤併用による相乗効果がなかった。すなわちこのことより、p53経路の活性化がAd-E1Bによる抗腫瘍効果に寄与することが明らかになった。そこで併用効果に関与する細胞側の因子を検討するために、Adの増殖に関与する各分子を検討すると、NF1分子の発現がAd-E1Bで誘導され、さらにMDM2阻害剤との併用で増大した。このことはNF1がAdのE1A分子で誘導され、さらにp53経路の活性化によって発現上昇がみられることを示唆している。

悪 sex of swollen は to bad after で, 従 の 枠 group み で の therapy で は have sharper sex が spent し い た め, new rules treatment 発 は tight の subject で あ る. Party ゲ ノ ム parsing に よ っ て, with disease に は な of special 徴 伝 sub - exist different が す る こ と が Ming ら か さ れ, this study で は こ の - different を using し て when the treatment research を be applied し た. 悪 sex of swollen で は p53 が normal type で の owe INK4A/ARF field loss し て い る た め, p14 お よ び p16 molecular 発 now が な く, p53 経 road が function に inactive し て い る. そ こ で, raised type で p53 molecule の 発 now を high め る group in え ア デ ノ ウ イ ル ス (Ad - E1B) を い る と, infection し た 悪 sex swollen cells に induced cell death が さ れ た. こ の と き early Ad の 応 a posthumous son 伝 で あ る E1A molecules, p53 molecule, with molecular の リ ン acidification 発 は now raised strong し て い た が, さ ら に p53 molecule の ユ ビ キ チ ン change を bear う MDM2 molecular の resistance against tonic で あ る nutlin - 3 - a を and す る と, phase 乗 な resistance swollen sores fruit comes unseen が ら れ た. And molecular の に written 発 now は さ ら に raised plus し て い た た め, p53 経 road の activeness が when the phase 乗 unseen fruit に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た. そ こ で こ れ を confirm す る た め に, p53, molecular の 発 を si - RNA を now use い て ノ ッ ク ダ ウ ン す る と, Ad - E1B 単 alone に よ cell damage active は support る さ れ て い た が, MDM2 resistance against tonic and に よ る phase 乗 unseen disappear fruit は し た. The effect of さらにp53 伝 offspring が variant <s:1> cells で がな and MDM2 inhibitor combined with による phase 乗 is がな った った. す な わ ち こ の こ と よ り, p53 経 road の activeness が Ad - E1B に よ る resistance swollen sores unseen fruit に send す る こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で and sharper fruit に masato and す る cells side の を beg す 検 る た め に, Ad の raised colonization に masato and す る each molecule を beg す 検 る と, NF1 molecular の 発 が Ad - now E1B で induced さ れ, さ ら に MDM2 resistance against tonic と の using で raised し た. こ の こ と は NF1 が Ad の E1A molecular で さ れ, さ ら に p53 経 road の activeness に よ っ て 発 now rising が み ら れ る こ と を in stopping し て い る.

项目成果

An MDM2 inhibitor induces expression of NFI, a cellular factor for adenovirus replications, and augmented cytotoxic effects of adenoviruses through DNA damage pathways

MDM2 抑制剂诱导 NFI（腺病毒复制的细胞因子）的表达，并通过 DNA 损伤途径增强腺病毒的细胞毒性作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Masatoshi Tagawa;Thao Thi Thanh Nguyen;Takao Morinaga;Yuji Tada;Kenzo Hiroshima
• 通讯作者: Kenzo Hiroshima

A drug targeting the G2/M phases enhances replications and cytotoxicity of oncolytic adenoviruses in p53-deficient cells

一种针对 G2/M 期的药物增强 p53 缺陷细胞中溶瘤腺病毒的复制和细胞毒性

• 发表时间: 2022
• 作者: Takao Morinaga;Masatoshi Tagawa
• 通讯作者: Masatoshi Tagawa

Cancer Cell-specific Transfection of hCas9 Gene Using Ad5F35 Vector

• DOI: 10.21873/anticanres.15164
• 发表时间: 2021-08-01
• 期刊: ANTICANCER RESEARCH
• 影响因子: 2
• 作者: Matsunaga, Wataru;Hamada, Katsuyuki;Gotoh, Akinobu
• 通讯作者: Gotoh, Akinobu