脂肪幹細胞を用いた唾液腺機能の回復-ドライマウスに対する細胞治療法の開発

C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)グリーンマウスから得られた脂肪由来幹細胞(ASC)を、シェーグレン症候群(SS)の病態を示すモデルマウスに移入を行った。SSモデルマウスとしては、NZB/Nslc x NZW/NSlc F1の交配によって生まれるNZBWF1マウスを使用した。当該マウスは、顎下腺における炎症性細胞浸潤が観察される。ASCの移植治療効果を検討する前段階として、 NZBWF1マウスの炎症性細胞浸潤について検討を行った。NZBWF1マウス(4ヶ月齢)を購入し、当大学にて1ヶ月以上飼育したマウスの内、炎症性細胞浸潤の確認ができた割合は80%であった。また、ASCの供与体としてC57BL/6-Tg(CAG-EGFP)マウス(6週齢)の鼠径部脂肪組織を切除・細切した後にコラゲナーゼにより分散、プレート上に播種し、脂肪幹細胞の採取を行った。得られた脂肪幹細胞を既知の各種細胞表面マーカーの発現について確認を行うと共に、骨、軟骨および脂肪への分化の確認を行った。NZBWF1マウスは、5ヶ月齢以降の♀マウスでSSの病態を高率に発症する。5ヶ月齢になった♀マウスを用い、ASCの移入を行った。 ASCとアテロコラーゲンゲルの混合液を作成し、1x105 cellsのASCを顎下腺近傍に移入した。ASC投与群, ASC非投与群, Wild type群(C57BL/6)の1,3,5週目の血清をアニマルランセットで採血し、5週目にそれぞれの顎下腺、涙腺を採取し、HEとPAS/Alucian Blue(pH2.5)染色を行い、「腺房」と「導管」の粘液分泌の機能の更新、減弱、唾液分泌の機能破壊(組織の萎縮などによる崩壊)の観察を行った。また投与5週目に採取した顎下腺・涙腺のGFP陽性細胞の生着と分化について検討を行った。

C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)グリーンマウスから得られた脂肪由来幹細胞(ASC)を、シェーグレン症候群(SS)の病態を示すモデルマウスに移入を行った。SSモデルマウスとしては、NZB/Nslc x NZW/NSlc F1の交配によって生まれるNZBWF1マウスを使用した。当該マウスは、顎下腺における炎症性細胞浸潤が観察される。ASCの移植治療効果を検討する前段階として、 NZBWF1マウスの炎症性細胞浸潤について検討を行った。NZBWF1マウス(4ヶ月齢)を購入し、当大学にて1ヶ月以上飼育したマウスの内、炎症性細胞浸潤の確認ができた割合は80%であった。また、ASCの供与体としてC57BL/6-Tg(CAG-EGFP)マウス(6週齢)の鼠径部脂肪組織を切除・細切した後にコラゲナーゼにより分散、プレート上に播種し、脂肪幹細胞の採取を行った。得られた脂肪幹細胞を既知の各種細胞表面マーカーの発現について確認を行うと共に、骨、軟骨および脂肪への分化の確認を行った。NZBWF1マウスは、5ヶ月齢以降の♀マウスでSSの病態を高率に発症する。5ヶ月齢になった♀マウスを用い、ASCの移入を行った。 ASCとアテロコラーゲンゲルの混合液を作成し、1x105 cellsのASCを顎下腺近傍に移入した。ASC投与群, ASC非投与群, Wild type群(C57BL/6)の1,3,5週目の血清をアニマルランセットで採血し、5週目にそれぞれの顎下腺、涙腺を採取し、HEとPAS/Alucian Blue(pH2.5)染色を行い、「腺房」と「導管」の粘液分泌の機能の更新、減弱、唾液分泌の機能破壊(組織の萎縮などによる崩壊)の観察を行った。また投与5週目に採取した顎下腺・涙腺のGFP陽性細胞の生着と分化について検討を行った。