遺伝子改変マウスを用いたMIRAGE症候群における副腎機能低下症の病態解明

使用转基因小鼠阐明 MIRAGE 综合征肾上腺功能低下的发病机制

基本信息

批准号：
21K08564
负责人：
長谷川奉延
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08564/
关键词：
MIRAGE症候群 SAMD9 遺伝子改変マウス副腎

项目摘要

内因性Sf1プロモーター・エンハンサーによりCreリコンビナーゼを発現するマウス（以下Sf1 promoter Creマウス）は、副腎皮質にCreリコンビナーゼを強発現する。我々は、Creリコンビナーゼによりヒト野生型SAMD9遺伝子を発現するマウス（SAMD9-WTマウス）、およびMIRAGE症候群で認めたヒトSAMD9点変異p.R1293Wを発現するマウス（SAMD9-MTマウス）を作成した。本研究では、SAMD9-WTマウスあるいはSAMD9-MTマウスとSf1 promoter Creマウスを掛け合わせ、胎児期から野生型SAMD9あるいは変異型SAMD9を副腎に強発現する遺伝子改変マウス（それぞれSAMD9-WT副腎発現マウス、およびSAMD9-MT副腎発現マウス）を作成している。SAMD9-WT副腎発現マウス51匹中48匹が24週齢まで生存し、さらに飼育継続中である。一方SAMD9-MT副腎発現マウス16匹のうち12匹は日齢0-1に、３匹は日齢7までに死亡し、１例は４週齢まで生存した。日齢1に安楽死させた雌SAMD9-WT副腎発現マウスの副腎は明らかな組織学的異常を認めなかった。また日齢1に死亡した雌SAMD9-MT副腎発現マウスの副腎は死後変化と思われる組織学的異常を認めた。４週齢まで生存した雌SAMD9-MT副腎発現マウスの副腎は明らかな組織学的異常を認めなかった。このマウスの副腎および他の臓器に、SAMD9機能保持に有利なreversion変異が入っていないかを解析中である。。現在、分娩直前の母体を帝王切開し、SAMD9-WT副腎発現マウスおよびSAMD9-MT副腎発現マウスを確実に回収し、胎子ごとホルマリン固定している。すでに、SAMD9-WT副腎発現マウス４匹およびSAMD9-MT副腎発現マウス１匹を得た。副腎の組織学的検討を進めている。

通过内源性SF1启动子增强子（以下称为SF1启动子Cre小鼠）表达CRE重组酶的小鼠在肾上腺皮质中强烈表达CRE重组酶。我们创建了通过CRE重组酶（SAMD9-WT小鼠）表达人类野生型SAMD9基因的小鼠，并在Mirage综合征（SAMD9-MT小鼠）中观察到了人类SAMD9点突变P.R1293W的小鼠。在这项研究中，将SAMD9-WT小鼠，SAMD9-MT小鼠和SF1启动子CRE小鼠组合在一起，以创建遗传修饰的小鼠，该小鼠在胎儿腺体中强烈表达野生型SAMD9或突变体SAMD9（来自胎儿的肾上腺（来自SAMD9-WT的小鼠SAMD9-WT肾上腺和表达SAMD9-SAMD9-MTRENAL表达SAMD9-MTERREN）的小鼠。在表达SAMD9-WT肾上腺的51只小鼠中，有48只幸存到24周龄，并且仍在饲养动物。另一方面，在表达SAMD9-MT肾上腺的16只小鼠中，有12人在0-1天死亡，3例死亡，7天死亡，一名患者幸存下来4周。雌性SAMD9-WT肾上腺表达小鼠的肾上腺在1岁时未能表现出明显的组织学异常。此外，死于1岁的女性SAMD9-MT表达肾上腺的小鼠的肾上腺表现出组织学异常，这似乎是验尸发生变化。雌性SAMD9-MT表达肾上腺表达的小鼠的肾上腺没有显示出任何明显的组织学异常。我们目前正在分析该小鼠的肾上腺和其他器官是否包含任何有利于维持SAMD9功能的反向突变。。目前，母亲在分娩前是剖宫产部分，表达SAMD9-WT和SAMD9-MT肾上腺的小鼠已被可靠地收集，并且福尔马林与胎儿固定。已经获得了表达SAMD9-WT肾上腺的四只小鼠和一只表达SAMD9-MT肾上腺的小鼠。肾上腺的组织学检查正在进行中。