統合的ストレス応答が敗血症関連脳障害に果たす役割の解明

阐明综合应激反应在脓毒症相关脑损伤中的作用

• 批准号: 21K08917
• 负责人: 森本 裕二
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08917/
• 关键词: 統合的ストレス応答; 敗血症関連脳障害; 敗血症; 認知機能低下

我々の目的は、敗血症モデルマウスを用いて敗血症性脳症(SAE)における統合的ストレス応答(ISR)の関与、ISRを制御する薬剤であるISRIBの効果について検討することである。初年度は、本研究に適した動物モデルの作成を試みた。2年度目は、行動学実験から一度離れ、敗血症罹患後の海馬におけるISR活性化を調べることとした。方法としては、盲腸結紮穿刺（CLP）モデルを使用し、ISR活性化で発現量が増加すると報告されているタンパクである、P-eIF2α、ATF4、CHOPの発現量をWestern blot法を用いて測定した。Western blot法によりP-eIF2α、eIF2αの発現を検出し、P-eIF2α/eIF2αを測定した。当初は先行研究でも使用していた蛍光Western blot法を用いて検出を試みたが、条件等の調節を行なっても検出力が足りず、P-eIF2αの検出が困難であった。化学発光Western blot法に変更したところ、感度が上がり、P-eIF2α、eIF2αを検出することができた。盲腸結紮穿刺（CLP）後24時間で、eIF2αは上昇が認められたが、P-eIF2αに上昇がなく、予想した結果と異なるものであった。ただし、eIF2αのバンドには下向きのスメアが発生しており、タンパクが分解した可能性が否定できないと考えた。海馬サンプルの蛋白溶解方法や、破砕方法、Western blot法の電気泳動、転写等の条件変更等を行なったが結果は同様であった。そこで、ISR活性化で上昇が予想されるATF4、CHOPなど別のタンパクの検出を試みた。いずれもCLP後24時間での上昇を認めなかった。CLP後遠隔期でのISR活性化の可能性も考えて、CLP後１週間でも同様のタンパクP-eIF2α、eIF2α、ATF4、CHOPを検出したが、CLP群での上昇を認めなかった。

The purpose of this study is to use the system of haematological disease (SAE) to respond to (ISR) and ISR to control the symptoms of haematological diseases (SAE). The results show that the symptoms are different. In the first year of this study, the animal experiment was completed in this study. 2. The results of the annual survey, the exercise test, and the ISR activation test after the onset of the disease. Methods Blind puncture (CLP), blind puncture (CLP), and ISR activation test were used to determine the concentration of P-eIF2 α, ATF4, CHOP and Western blot. Western blot method was used to determine P-eIF2 α, eIF2 α and P-eIF2 α