骨肉腫における抗がん剤耐性や肺転移に関するマイクロRNAの解析

本研究の目的は、骨肉腫の抗がん剤耐性や肺転移における促進もしくは抑制因子としての マイクロ RNAの解析を行うことであり、具体的には、ヒト骨肉腫細胞株の親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株を対象に以下の課題について検討を行う。1) 親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株とのマイクロ RNAの発現を比較検討。2) マイクロRNAの発現解析に基づいて、その下流のメッセンジャーRNA（mRNA）やタンパク質の発現解析ならびにその分子の抗がん剤耐性能獲得、肺転移の促進もしくは抑制効果を、マウスを用いた in vivo での比較検討する。親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株の分子プロファイリングを解析し、抗がん剤耐能獲得や肺転移能獲得の機序解明や治療法開発を目指す。前年度の研究実績の概要は、細胞質に赤色蛍光タンパク、核に緑色蛍光タンパクを形質導入したdual-color ヒト骨肉腫143B細胞株へ骨肉腫治療薬であるシスプラチンとアドリアンシンをそれぞれ低濃度で培養液に加えて培養・継代を継続し、抗がん剤耐性の dual-color 143B細胞株（143B-CR-CDDP、143B-CR-DOX）を樹立した。また、dual color 143B細胞株をヌードマウスの脛骨に同所移植したマウスの肺転移から蛍光を有する肺転移巣を摘出培養し、前述のin vivo 継代を4代繰り返した dual color 143B-LM4 細胞株はすでに樹立している。今年度の研究実績の概要は、143B細胞株と高肺転移株 143B-LM4 細胞株よりマイクロRANを抽出し、マイクロアレイによる包括的なマイクロRNAの発現を解析した。マイクロアレイの解析より down regulation したマイクロRNAとup regulation したマイクロRNAが今後の詳細な解析対処の候補として挙げられた。

本研究の目的は、骨肉腫の抗がん剤耐性や肺転移における促進もしくは抑制因子としての マイクロ RNAの解析を行うことであり、具体的には、ヒト骨肉腫細胞株の親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株を対象に以下の課題について検討を行う。1) 親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株とのマイクロ RNAの発現を比較検討。2) マイクロRNAの発現解析に基づいて、その下流のメッセンジャーRNA（mRNA）やタンパク質の発現解析ならびにその分子の抗がん剤耐性能獲得、肺転移の促進もしくは抑制効果を、マウスを用いた in vivo での比較検討する。親株、抗がん剤耐性株、高肺転移株の分子プロファイリングを解析し、抗がん剤耐能獲得や肺転移能獲得の機序解明や治療法開発を目指す。前年度の研究実績の概要は、細胞質に赤色蛍光タンパク、核に緑色蛍光タンパクを形質導入したdual-color ヒト骨肉腫143B細胞株へ骨肉腫治療薬であるシスプラチンとアドリアンシンをそれぞれ低濃度で培養液に加えて培養・継代を継続し、抗がん剤耐性の dual-color 143B細胞株（143B-CR-CDDP、143B-CR-DOX）を樹立した。また、dual color 143B細胞株をヌードマウスの脛骨に同所移植したマウスの肺転移から蛍光を有する肺転移巣を摘出培養し、前述のin vivo 継代を4代繰り返した dual color 143B-LM4 細胞株はすでに樹立している。今年度の研究実績の概要は、143B細胞株と高肺転移株 143B-LM4 細胞株よりマイクロRANを抽出し、マイクロアレイによる包括的なマイクロRNAの発現を解析した。マイクロアレイの解析より down regulation したマイクロRNAとup regulation したマイクロRNAが今後の詳細な解析対処の候補として挙げられた。