Tight Junction-Proteine bei entzündlichen Darmerkrankungen

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Im entzündeten Colon bei Morbus Crohn werden (i) Mechanismen epithelialer Barrierestörung mittels Impedanzanalyse, Conductance Scanning, Gefrierbruch-Elektronenmikroskopie, konfokaler Mikroskopie sowie Western-blotting und quantitativer PCR analysiert. Dabei werden Occludin und Mitglieder der Claudin-Familie als Komponenten der epithelialen Tight Junction erfasst. Dann (ii) wird der Frage nachgegangen, ob die Barrierestörung bei M. Crohn entzündungsbedingt ist - also sekundärer Natur - oder ob sich auch Hinweise für eine primäre Barrierestörung bei den Tight Junction-Molekülen finden. Ein weiterer Schwerpunkt (iii) wird in der Charakterisierung der epithelialen Tight Junction bei Pouchitis bestehen. Weiterhin werden Mechanismen der entzündlichen Regulation der epithelialen Tight Junction durch TNF¿, Interferon-¿, lnterleukin-1ß, lnterleukin-6 und lnterleukin-13 im HT-29/B6-Zellkulturmodell studiert, und zwar (iv) das Expressionslevel der Proteine samt Halblebenszeiten und ihre subzelluläre Verteilung, (v) deren mRNA-Expression samt mRNAStabilitäten, (vi) deren Promotor-Aktivität und (vii) dabei relevante Signaltransduktionsmechanismen wie Zytokin-Einflüsse samt ihrer intrazellulären Signalwege und nuklearen Bindungsfaktoren. Schließlich (viii) werden einzelne am Zellkultursystem identifizierte Regulationseinflüsse am nativen Darm (gestrippten Rektumpräparat) bestätigt.