エクソソーム解析による頭頸部癌の転移能に関するバイオマーカーの探索と予後との関連

利用外泌体分析寻找与头颈癌转移潜能相关的生物标志物及其与预后的关系

• 批准号: 21K09607
• 负责人: 星川 広史
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09607/
• 关键词: エクソソーム; 転移; バイオマーカー; 頭頸部癌

頭頸部癌培養細胞において、Allose奏効群ではTXNIPのmRNA発現が著明に増強し、CXCR4の発現が抑制された(Allose50mM投与48時間後 HSC3:TXNIP 132倍、CXCR4 0.1倍, Ca9-22: TXNIP 289倍、CXCR4 0.71倍、Allose50mM投与12時間後 HSC3-M3：TXNIP 11倍、CXCR4 0.23倍)。Allose無効群ではAllose投与によりTXNIPのmRNA発現はやや増強したが、CXCR4の発現も増強した (HSC4: TXNIP 11倍、CXCR4 1.91倍)。頭頸部癌においてエクソソーム中のCXCR4, CXCL12の存在を同定し、それらが癌の転移にどのように関与しているかを検証するために、①メンブレンにエクソソームを吸着させ溶出させる方法（exoEasy Maxi Kit）でCa9-22細胞のエクソソームを抽出、RNAを精製し、realtime PCRでTXNIP, CXCR4, CXCL12を検討したが、mRNAの増幅は観察されなかった。そこで、超遠心法を用いてエクソソームの抽出を依頼、結果HSC3, HSC4, KONの3種類の細胞上清から4.47E+10～1.32E+11(particles/ml)の細胞外小胞を得た。その試料を用いてexoRNAEasy Maxi Kitで total RNAを抽出した。結果、HSC4からはcontrol, Allose投与群いずれからもRNAが抽出できたが、HSC3, KONからはAllose投与群からはRNAが得られなかった。HSC4から得られたRNAからCXCR4, CXCL12の増幅を検討したが、以前のCa9-22と同様にcontrol, Allose投与群のいずれからもmRNAの増幅は観察されなかった。

After 48 hours of Allose50mM, HSC3:TXNIP, CXCR4, Ca9-22: TXNIP, CXCR4, Allose50mM, Allose50mM, HSC3-M3:TXNIP, CXCR4), the results of cell culture and CXCR4 showed that there were significant differences in cell culture and CXCR4 inhibition (HSC3:TXNIP 132fold, CXCR4 0.1fold, Ca9-22: TXNIP 289fold, CXCR4 0.23fold). The results of Allose-free Allose and TXNIP-free mRNA showed that both HSC4 and CXCR4 showed significant improvement (HSC4: 11 times of TXNIP, 1.91 times of CXCR4). The CXCR4, CXCL12 in the partial cancer cell line contains the same gene, the cancer is moved, the cancer is moved, and the cancer is removed. The TXNIP, CXCR4, realtime PCR, TXNIP, CXCR4 are different from each other in the same way. CXCL12, mRNA, please check the size of the picture. The supernatant and supernatant of HSC3, HSC4 and KON 3 were extracted from the supernatant of 4.47E+10~1.32E+11 (particles/ml) and extracellular vesicles. Use the exoRNAEasy Maxi Kit total RNA to extract the material. Results: the results showed that HSC4, Allose, HSC3, KON, Allose and RNA got better results than those of the group. HSC4 received the same message as Ca9-22 in CXCR4, CXCL12 in Ca9-22, and Allose voted in the group to check the price of mRNA.