Regulation of Ocular Surface Inflammation by miR-628 via Innate Immunity and Its Application to Novel Therapeutic Methods

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申請者は、長年の研究を経て、TLR3が眼表面炎症を正に制御していることを報告し、眼表面炎症に自然免疫機構が大きく関与していることを証明してきた。さらに眼表面炎症疾患の病態解明研究の一環で、miR-628が眼表面炎症疾患のバイオマーカーとなることを見出している。大変興味深いことに、miR-628-3pを抑制することにより眼表面炎症を正に制御しているTLR3の発現が有意に抑制されることも明らかとしている。このことは、miR-628-3pの機能解析が、自然免疫を介した眼表面炎症制御機構の解明につながることを示している。2022年度は、ヒト培養結膜上皮細胞にhsa-miR-628-3pのinhibitorを遺伝子導入し、has-miR-628-3pの発現を抑制させた。hsa-miR-628-3p inhibitorあるいはnegative controlを遺伝子導入したヒト培養結膜上皮細胞について、マイクロアレイを用いて網羅的遺伝子発現解析を行った。その結果、hsa-miR-628-3pの発現を抑制させたヒト培養結膜上皮細胞において、９遺伝子について２倍以上発現が上昇していた。これらは、IFI44L、LYRM9、THUMPD3-AS1、FBXW10、ATP12A、SPRR2B、PPM1K、MX2、RNY4P13であり、自然免疫応答に関連するのものが多く含まれていた。また、ヒト培養結膜上皮細胞にhsa-miR-628-3pのmimicを遺伝子導入し、has-miR-628-3pを過剰発現させた。hsa-miR-628-3p mimicあるいはnegative controlを遺伝子導入したヒト培養結膜上皮細胞について、マイクロアレイを用いて網羅的遺伝子発現解析を行った。その結果、hsa-miR-628-3pを過剰発現を抑制させたヒト培養結膜上皮細胞において、３遺伝子について２倍以上発現が上昇していた。これらは、ZNF487、LYZL1、RNU6-23Pであった。