Elucidation on pathophysiology of immune-mediated dry eye disease by depleting senolytic reagents

GVHDマウスモデルにおける老化関連分泌形質（Senecence-associated secretory phenotype;SASP)を分泌するの老化細胞の細胞源の解明を目標としてGVHDマウスモデルのマクロファージ、T 細胞、B 細胞、樹状細胞について、フルオサイトメトリーを用いて老化細胞マーカーを組み合わせて主にフルオロサイトメトリーによる解析をコントロールと比較し研究を遂行した。骨髄移植の要である放射線照射装置の不具合により一時実験の遂行に遅れを生じたが2022年7月より装置が安定し、その後は順調に遂行することができた。その結果、GVHDマウスモデルにおいてはCD153陽性PD-1陽性T細胞がコントロールに比較して著明に増加していた。B細胞についても検討を行い、GVHDマウスモデルの末梢血においてコントロールに比較して有意に老化B細胞が増加していることを見出した。これらの変化をGVHDマウスモデルで経時的に移植前、移植後2週後、3週後、4週後、5週後と検討し、GVHDとコントロールマウスとの間に、有意な差を認めるにいたっている。これらの変化とSASPの変化との関連も検討中である。骨髄移植後のGVHDマウスモデルで、T細胞とB細胞両者が老化していることを見出した。樹状細胞についてはまだ検討が不十分であり、有意な差を認めるまでにはいたっていない。ファイブロサイトについてはT細胞、B細胞との共培養を目標に涙腺、マイボーム腺からの培養細胞の樹立を試みた。マイボーム腺からの培養細胞では継代培養に成功している。今後老化T細胞、B細胞とファイブロサイトとの共培養から病的関連因子をSASPとの関連を含めて特定していく予定である。

GVHDマウスモデルにおける老化関連分泌形質（Senecence-associated secretory phenotype;SASP)を分泌するの老化細胞の細胞源の解明を目標としてGVHDマウスモデルのマクロファージ、T 細胞、B 細胞、樹状細胞について、フルオサイトメトリーを用いて老化細胞マーカーを組み合わせて主にフルオロサイトメトリーによる解析をコントロールと比較し研究を遂行した。骨髄移植の要である放射線照射装置の不具合により一時実験の遂行に遅れを生じたが2022年7月より装置が安定し、その後は順調に遂行することができた。その結果、GVHDマウスモデルにおいてはCD153陽性PD-1陽性T細胞がコントロールに比較して著明に増加していた。B細胞についても検討を行い、GVHDマウスモデルの末梢血においてコントロールに比較して有意に老化B細胞が増加していることを見出した。これらの変化をGVHDマウスモデルで経時的に移植前、移植後2週後、3週後、4週後、5週後と検討し、GVHDとコントロールマウスとの間に、有意な差を認めるにいたっている。これらの変化とSASPの変化との関連も検討中である。骨髄移植後のGVHDマウスモデルで、T細胞とB細胞両者が老化していることを見出した。樹状細胞についてはまだ検討が不十分であり、有意な差を認めるまでにはいたっていない。ファイブロサイトについてはT細胞、B細胞との共培養を目標に涙腺、マイボーム腺からの培養細胞の樹立を試みた。マイボーム腺からの培養細胞では継代培養に成功している。今後老化T細胞、B細胞とファイブロサイトとの共培養から病的関連因子をSASPとの関連を含めて特定していく予定である。