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起源の異なる海馬神経幹細胞がもたらす成体期神経新生および歯状回形成機構の比較解析

不同来源海马神经干细胞引起成体神经发生和齿状回形成机制的比较分析

基本信息

批准号：
20K07233
负责人：
篠原広志
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

記憶・学習に重要な海馬の歯状回では、成体期までニューロンの新生が継続する特徴がある。しかしながらこの成体期ニューロン新生がいつ・どこから産まれた神経幹細胞によってもたらされるかは不明である。この神経幹細胞の所在を調べるべく、その誕生地として予想される海馬背側部および腹側部を子宮内電気穿孔法によって同時に標識した。この方法により、いずれの領域由来の神経幹細胞が成体期ニューロン新生に寄与しているかを調べることにした。この際、背側および腹側の神経幹細胞を区別して標識するために、それぞれの領域に発現が特異的な分子のプロモーターを用いることにした。背側領域の標識はPB-Hopx-RFP、一方で腹側領域の標識はPB-Gli-GFPをそれぞれ設計・作製した。さらに海馬の歯状回の形成発生機構を解明するために、マイクロアレイ解析やシングルセル解析により、海馬領域特異的に発現が認められる分子を複数見いだした。現在はこれらの分子のプロモーター制御下で蛍光タンパク質が発現するコンストラクトを作製し、子宮内電気穿孔法を用いて、海馬歯状回形成や神経新生に寄与する細胞の多様性を分類して理解する研究も進めている。具体的には、我々はすでに発生中の海馬歯状回での細胞移動において、移動経路や形態・運命が異なる様々な細胞の種類があることをスライス培養しタイムラプス解析によって見いだしている。上記のように分子によって識別される細胞画分が、どの細胞種と対応するかについて解析を進めている。

The hippocampus is important for memory and learning. The stem cells were born in the adult stage. The neural stem cells are located in the dorsal hippocampus and ventral hippocampus. The method includes the following steps: first, the growth of neural stem cells in adult stage; second, the growth of neural stem cells in adult stage; third, the growth of neural stem cells in adult stage; and fourth, the growth of neural stem cells in adult stage. In this case, the dorsal and ventral neural stem cells are identified and used to develop specific molecules. The logo for the dorsal domain is PB-Hopx-RFP, and the logo for the ventral domain is PB-Gli-GFP. The molecular structure of hippocampal dentate gyrus formation was analyzed. Now, we are going to study the classification and understanding of the diversity of cells under the control of molecular processes, the use of intrauterine electroporation, hippocampal dentate gyrus formation, and neurogenesis. The specific cell migration, migration pathway, morphology and fate of developing hippocampal dentate gyrus vary from cell type to cell type, and from cell culture to cell analysis. Note that the molecular identification of the cell is divided into two parts, and the cell species identification is divided into two parts.