実験的歯周炎における歯肉溝滲出液、歯肉および歯槽骨プロテオグリカンの動態

实验性牙周炎中龈沟液、牙龈和牙槽骨蛋白多糖的动态变化

• 批准号: 07771806
• 负责人: 村橋 慶宣
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771806/
• 关键词: プロテオグリカン; 歯肉溝滲出液; 歯肉; 骨; ウエスタンブロッティング

歯肉溝滲出液(GCF)に含まれるプロテオグリカン(PG)の炎症に伴う分子量の変化、由来組織は不明である。本研究はイヌ実験的歯周炎の進行に伴うGCF,歯肉,歯槽骨のコンドロイチン4硫酸プロテオグリカン(C4S-PG),コンドロイチン6硫酸プロテオグリカン(C6S-PG),デルマタン硫酸プロテオグリカン(DS-PG)の分子量の変化と、それらを各サンプル間で並列比較検討してGCFの由来組織を考察するために行った。雑種成犬12頭の臼歯部歯肉に絹糸を2重に結紮して実験的歯周炎を惹起し、0日(健常,非結紮)、結紮3,7日(急性炎症期)、21日(慢性炎症期)の各ステージで、血清、GCF、歯肉、骨を採取し、サンプルを抽出し、作製し、その後各サンプルはウエスタンブロティングを行い、モノクローナル抗体(2-B-6,3-B-3)を用い免疫染色を行った。GCFは、C4S-PG, C6S-PG, DS-PG共に、健常時には12-18, 28-49KDaの間に血清には認められないバンドが存在し、その分子量は(C4S-PG:16,18,40,47KDa, C6S-PG:16,18,41,49KDa、DS-PG:15,18,37,46KDa)であった。また、結紮日数の増加に伴い健常時には認めなかったバンドを検出し、その構成は各ステージ間で変化が見られた。すなわち、12-18KDaのバンドはC4S-PGでは3日に、C6S-PG, DS-PGでは7日に最も数多いバンドを検出した(C4S-PG, C6S-PG:15,16,17,18KDa, DS-PG:12,13,15,17,18KDa)。一方、28-49KDaのバンド数は3,7日に増加し、C4S-PGでは31KDa(3,7日)37KDa(3日)45KDa(7日)に、C6S-PGでは34KDa(3,7日)46KDa(3日)に、DS-PGでは42KDa(3日)35KDa(3日)35KDa(7日)に他のステージに認められないバンドを検出しした。GCFと歯肉に分子量の比較では、12-18, 28-49KDa間には炎症に伴い同じ分子量を多数検出した(C4S-PG:15,16,17,31,33,35KDa, C6S-PG:14,16,17,18KDa, DS-PG:15,17,18,33,35,40KDa)。さらにGCFと歯槽骨間では、C4S-PG, C6S-PGの16KDaとC4S-PGの7日に検出した45KDaは骨にも認められた。以上の結果よりGCFのC4S-PG, C6S-PG, DS-PGは炎症の進行に伴い分子量レベルで変化し、歯肉、歯槽骨由来の組織代謝産物、破壊産物が含まれている可能性が示唆された。

GCF contains inflammation associated with molecular weight changes and tissue of unknown origin. In this study, the molecular weight variation of GCF, tooth pulp, tooth socket bone and tooth pulp (C4S-PG), C6S-PG, DS-PG) was investigated and compared. 12 adult dogs were bred with 2-fold ligation of the dental pulp and 2-fold ligation of the dental pulp. Periodontitis was initiated, 0 days (normal, non-ligation), 3, 7 days (acute inflammation), and 21 days (chronic inflammation). Serum, GCF, dental pulp, and bone samples were collected, stored, and processed.(2-B-6,3-B-3) Immunostaining was performed. GCF, C4S-PG, C6S-PG, DS-PG are present in serum between 12-18, 28-49KDa at normal and normal times, and molecular weights (C4S-PG:16,18,40,47KDa, C6S-PG: 16, 18,41,49KDa, DS-PG:15,18,37,46KDa) are also present. The number of days of separation increases, and the number of days of separation increases. C4S-PG, C6S-PG, DS-PG, DS- One side, 28-49KDa and the number of entries increased from 3,7 days, C4S-PG 31KDa(3,7 days) 3,7 KDa(3 days)45KDa(7 days), C6S-PG 34KDa(3,7 days)46KDa(3 days), DS-PG 42KDa(3 days) 35 KDa (3 days) 35 KDa(7 days) and other entries were detected. The molecular weight of GCF was 12-18, 28-49KDa, and most of them were inflammatory (C4S-PG:15,16,17,31,33,35KDa, C6S-PG:14,16,17,18KDa, DS-PG:15,17,18,33,35,40KDa). In addition, between the GCF and the alveolar bone, C4S-PG, C6S-PG of 16KDa and C4S-PG of 45KDa were detected on the 7th. The above results indicate the possibility that C4S-PG, C6S-PG, DS-PG of GCF may be associated with the development of inflammation, and that tissue metabolites and breakdown products derived from dental pulp and alveolar bone may be involved.