大腸菌の染色体複製開始時における二重鎖開裂部位の再定義と新規関連因子の解析

重新定义大肠杆菌染色体复制起始处的双链切割位点并分析新的相关因素

• 批准号: 20K15717
• 负责人: 永田 麻梨子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K15717/
• 关键词: ヘリカーゼ; DNA複製; 複製開始; 染色体複製起点; 複製開始複合体; 高次複合体

染色体DNA複製反応は、複製起点において二重鎖DNAを部分的に開裂して２つの一本鎖にすることから開始する。このため複製起点には多数のタンパク質が結合し動的な開始複合体を形成する。さらに複製起点で生じた一本鎖DNA には２分子の複製ヘリカーゼがそれぞれ反対方向に装着され、両方向複製の基盤となる構造を形成する。この原則は細胞性生物で共通だと考えられるが、比較的研究が進んでいる大腸菌においてすら、複製ヘリカーゼ装着の分子機構についてはいまだに大部分が不明である。大腸菌の染色体複製起点oriCは、複製開始タンパク質DnaAの結合配列(DnaA box)のクラスター領域(DOR)と、ATリッチな二重鎖開裂領域(DUE)とで構成される。さらに、DUEの外側にもATリッチ領域が存在している。DORはDnaA boxの配置に依存して左、右、中央の３領域に分かれる。左右それぞれのDOR領域ではDnaAが五量体となるサブ複合体が形成される。左DOR・DnaAサブ複合体はDNA屈曲因子IHFによるDNA屈曲と協調してDUEを部分的に開裂し、生じた一本鎖DNAと結合する。その後、ヘリカーゼローダーDnaCと複合体を形成した複製ヘリカーゼDnaBは、DnaA複合体との相互作用を介して一本鎖DNAに装着する。DnaBヘリカーゼ装着過程においては、DUE領域のみならず、隣接するATリッチ領域まで一本鎖化領域が拡張することも報告されている。しかしながら、その分子機構や意義については解明されていない。今回、右DOR・DnaAサブ複合体の特異的な機能を詳細に解析した。その結果、DnaBヘリカーゼ装着過程におけるoriC DNAの一本鎖化領域の拡張は、右DOR・DnaAサブ複合体に大きく依存していることが新たにわかった。この分子機構について解析結果を示し、生物種での共通性も含めその意義を考察してきた。

Chromosomal DNA replication anti 応 は, copy starting point に お い て double lock part of DNA を に cracking し て 2 つ の a lock に す る こ と か ら start す る. The を ため ため replication site に する the majority of <s:1> タ パ パ the dendritic が combines with the な initiation complex を to form する. さ ら に copy starting point で raw じ た a lock に DNA molecular の は 2 copy ヘ リ カ ー ゼ が そ れ ぞ れ reverse direction seaborne に containing さ れ, struck the direction replication の base plate と な を る structure form す る. こ の principles は cell sex biological で だ と exam え ら れ る が, comparative study of が into ん で い る coliform に お い て す ら, duplicate ヘ リ カ ー ゼ containing の molecular institutions に つ い て は い ま だ に most が unknown で あ る. Coliform の chromosome copy starting point oriC は, duplicate タ ン パ ク qualitative DnaA の combined with column (DnaA box) の ク ラ ス タ ー areas (are) と, ats リ ッ チ な double lock cracking area (DUE) と で constitute さ れ る. On the outside of さらに, DUE さらに に に ATリッチ が there exists が て る る る る る. The DOR DnaA box <s:1> configuration に depends on the left, right, and central <s:1> domains に sub-れ る れる. The left and right それぞれ <s:1> DOR domains で で DnaAが five-volume となるサブ complex が forms される. Left are · DnaA サ ブ complex は DNA buckling factor IHF に よ る DNA buckling と coordination し て DUE part of を に cracking し, raw じ た と combined with a lock DNA す る. , after そ の ヘ リ カ ー ゼ ロ ー ダ ー DnaC と complex を form し た copy ヘ リ カ ー ゼ DnaB は, DnaA complex と の を interface interaction between し て a lock に DNA containing す る. DnaB ヘ リ カ ー ゼ containing process に お い て は, DUE の み な ら ず, 隣 す る AT リ ッ チ field ま で が a lock change field company, zhang す る こ と も report さ れ て い る. <s:1> に ながら, そ そ molecular structure や meaning に に て て て explanation されて な な な. This time, the detailed に analysis of the specific な function of the right DOR · DnaAサブ complex を た. そ の results, DnaB ヘ リ カ ー ゼ containing process に お け る oriC DNA の の a lock change field company, zhang は, right are DnaA サ ブ complex に big き く dependent し て い る こ と が new た に わ か っ た. The <s:1> molecular structure に に て て て analysis results を show that <s:1>, biological species で <s:1> commonality <e:1> contains めそ <s:1> significance を investigation て て た た た た.

项目成果

大腸菌染色体の複製起点における一本鎖DNA形成の動的メカニズムとDnaBヘリカーゼ装着における意義

大肠杆菌染色体复制起点单链DNA形成的动态机制及其在DnaB解旋酶附着中的意义

• 发表时间: 2020
• 作者: 永田麻梨子;崎山友香里;尾崎省吾;片山 勉
• 通讯作者: 片山 勉