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大腸菌の染色体複製開始時における二重鎖開裂部位の再定義と新規関連因子の解析

重新定义大肠杆菌染色体复制起始处的双链切割位点并分析新的相关因素

基本信息

批准号：
20K15717
负责人：
永田麻梨子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

染色体DNA複製反応は、複製起点において二重鎖DNAを部分的に開裂して２つの一本鎖にすることから開始する。このため複製起点には多数のタンパク質が結合し動的な開始複合体を形成する。さらに複製起点で生じた一本鎖DNA には２分子の複製ヘリカーゼがそれぞれ反対方向に装着され、両方向複製の基盤となる構造を形成する。この原則は細胞性生物で共通だと考えられるが、比較的研究が進んでいる大腸菌においてすら、複製ヘリカーゼ装着の分子機構についてはいまだに大部分が不明である。大腸菌の染色体複製起点oriCは、複製開始タンパク質DnaAの結合配列(DnaA box)のクラスター領域(DOR)と、ATリッチな二重鎖開裂領域(DUE)とで構成される。さらに、DUEの外側にもATリッチ領域が存在している。DORはDnaA boxの配置に依存して左、右、中央の３領域に分かれる。左右それぞれのDOR領域ではDnaAが五量体となるサブ複合体が形成される。左DOR・DnaAサブ複合体はDNA屈曲因子IHFによるDNA屈曲と協調してDUEを部分的に開裂し、生じた一本鎖DNAと結合する。その後、ヘリカーゼローダーDnaCと複合体を形成した複製ヘリカーゼDnaBは、DnaA複合体との相互作用を介して一本鎖DNAに装着する。DnaBヘリカーゼ装着過程においては、DUE領域のみならず、隣接するATリッチ領域まで一本鎖化領域が拡張することも報告されている。しかしながら、その分子機構や意義については解明されていない。今回、右DOR・DnaAサブ複合体の特異的な機能を詳細に解析した。その結果、DnaBヘリカーゼ装着過程におけるoriC DNAの一本鎖化領域の拡張は、右DOR・DnaAサブ複合体に大きく依存していることが新たにわかった。この分子機構について解析結果を示し、生物種での共通性も含めその意義を考察してきた。

Chromosome DNA copy reverse copy, copy the starting point of the double DNA part of the split section 2, the beginning of the copy is the beginning of a copy of the chromosome DNA copy. At the beginning of a copy, most of the starting point of a copy is combined with the beginning of the operation to form a copy. The starting point of the DNA copy is the starting point of the copy. The starting point of the copy is the starting point of the copy. The starting point of the copy is the starting point of the copy. According to the policy, the study of cellular biology is very important in the study of pathogenic bacteria, bacteria, and copies. Molecular mechanisms are used to detect most of the unknown bacteria. The starting point of chromosome replication of Magnolia spp. OriC, the beginning of replication, the combination of DnaA box and DOR, and the double split of AT, DUE, can be used to form a cluster. There is an error in the field of information, DUE, AT, etc. DOR "DnaA box" configuration "dependency" left, right, and central "3 domains" sub-domains. On the left and right, the DOR field is full of DnaA quanta, and the complex is formed. The left DOR ·DnaA complex contains DNA buckling factor IHF buckling DNA buckling coordination DUE part of the crack, and a copy of the DNA combination book. After that, the DnaC complex forms a copy, the DnaB, the DnaA complex, the interaction, the DNA, the package. The DnaB information system is equipped with the following information: the process information, the DUE domain information, and the connection between the AT information and the report. The meaning of the molecular organization is to understand the meaning of the information. This time, the machine of the DOR ·DnaA complex feature can be used to parse the data. The results show that DnaB is equipped with a full text of oriC DNA, a copy of the right DOR DnaA complex, and a new version of dependency data. The results of analysis by molecular institutions show that the commonality of biological species implies the meaning of investigation.