SF-1を介した変異KCNJ5抑制による原発性アルドステロン症の治療開発

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本邦における原発性アルドステロン症の主病態であるアルドステロン産生副腎皮質腺腫(APA)における腫瘍発症機構解明の一因として、私達はカリウムチャネルの一つであるKCNJ5遺伝子の副腎皮質細胞における体細胞変異に着目して研究を進めてきた。前年度までに、KCNJ5遺伝子のサブクローニングを行い、副腎皮質特異的転写因子Steroidogenic factor-1（SF-1）が、KCNJ5遺伝子プロモーター上のSF-1応答領を介して遺伝子発現制御していることや、KCNJ5遺伝子発現が副腎皮質球状層にほぼ限局していることを見出し、副腎癌細胞由来のH295R細胞株を用いて抗SF-1抗体によるChIP(クロマチン免疫沈降)アッセイを施行し、KCNJ5遺伝子プロモーター領域のSF-1応答配列へのSF-1のrecruitmentを確認してきた。令和４年度は、私達が既に作製・樹立しておいた変異KCNJ5恒常的発現H295R細胞株と、対照群としての野生型KCNJ5恒常的発現H295R細胞株から、それぞれRNAを抽出し、Qualityチェックの後、cDNAマイクロアレイ解析を施行した。解析結果を元にパスウェイ解析やGO解析を行い、変異KCNJ5遺伝子によって発現量が大きく変動する遺伝子群を網羅的に解析した。また変異KCNJ5恒常的発現H295R細胞株と野生型KCNJ5恒常的発現H295R細胞株の継代培養を継続し、経時的な形態変化を確認した。また、私等が既に樹立し、保有している変異KCNJ5ノックインマウスの継代と観察を行なった。生後６月齢までの観察では、野生型マウスと比較しても変異KCNJ5ノックインマウスの副腎には肉眼的には腫瘍性変化を認めなかった。