セレコキシブによる新規ケロイド・肥厚性瘢痕治療法の開発に向けた基盤研究

基础研究旨在开发一种使用塞来昔布治疗疤痕疙瘩和增生性疤痕的新方法

• 批准号: 20K18429
• 负责人: 松永 洋明
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18429/
• 关键词: ケロイド; 肥厚性瘢痕; 強皮症; セレコキシブ; GSK-3; 創傷治癒

本研究は、GSK-3β-KOマウスと野生型マウスを用いて、ケロイド・肥厚性瘢痕形成におけるGSK-3を介した筋線維芽細胞制御機構からの発症メカニズムを明らかにするとともに、GSK-3活性化作用と抗炎症作用を併せ持つセレコキシブの治療効果を検討することで新たな治療法の開発へと繋げることを目的としており、同時にこれらの検討を行う上で必要な信頼性のある動物瘢痕モデルの作成を目指した。この中で、初年度は動物瘢痕モデルの作成を行なった。C57/BL6マウス（8-10週齢）に対し、セボフルラン吸入麻酔下で背部に直径8mmの皮膚生検トレパンを用いて円形皮膚全層欠損創を作製し、この創傷が収縮しないよう円柱状の創傷収縮抑制リングを周囲皮膚に縫い付けた。これにより創傷の収縮および周囲からの上皮化を制御し線維化を促した。1週間ごとに創傷の一部を採取してH&E染色、Masson trichrome染色を行い、線維化を継時的に観察し、ケロイド・肥厚性瘢痕モデルとしての有用性を評価した。しかし、いずれの週数においても肥厚性瘢痕やケロイドの所見を呈することはなかった。そこで、ケロイド・肥厚性瘢痕は真皮の線維化や肥厚を生じることから、全身性強皮症に着目しモデル作成を行うこととした。強皮症のモデルマウスは抗がん剤の1種であるブレオマイシンを皮下に局所注射することで作成した。GSK-3β-KO、-WTマウス（6-8週齢）、Hos:HR-1マウスの背部にブレオマイシン50μg/day皮下注射を4週間投与し、投与後に創部を摘出し、強皮症の発現を免疫染色やH&E、Masson trichrome染色で評価し、皮膚肥厚を認める強皮症モデルマウスが作製できる事を確認した。現在はセレコキシブ局所投与の影響を見ているところである。

这项研究旨在阐明使用GSK-3β-KO小鼠和野生型小鼠在Keloid和肥大性疤痕形成中GSK-3介导的肌纤维细胞调节的机制，并通过研究GSK-3激活性质的Celecoxib来检查celecoxib的治疗效果，从而开发新的治疗方法。同时，我们旨在创建一个可靠的动物疤痕模型，这些模型是这些研究所必需的。其中，在第一年创建了动物疤痕模型。使用直径8 mm的皮肤活检训练锅在七氟硫富烷吸入麻醉下，使用C57/BL6小鼠（8-10周）在背部造成圆形全厚度缺陷伤口，并在周围的皮肤上缝制圆柱伤口伤口抑制剂环，以防止伤口缝制。这控制了周围区域的伤口收缩和上皮化，从而鼓励纤维化。每周收集一部分伤口，并进行H＆E染色和Masson Trichrome染色，以一次观察纤维化，并评估其作为乳突和肥大疤痕模型的有用性。然而，在任何几周的任何几周中都没有提出肥厚疤痕或酮的发现。因此，酮和肥厚性疤痕会导致真皮的纤维化和增厚，因此我们决定创建一个针对全身性硬皮病的模型。用硬皮病的模型小鼠皮下局部注射博来霉素（一种抗癌药物）。 GSK-3β-KO, -WT mice (6-8 weeks old), and Hos:HR-1 mice were given a 50 μg/day subcutaneous injection of bleomycin for 4 weeks, and after administration, the wound was removed, and the occurrence of scleroderma was evaluated using immunostaining, H&E, and Masson trichrome staining, and it was confirmed that a scleroderma model mouse with skin可以产生增厚。目前，我们正在研究局部塞来昔布给药的影响。